生姜提取液对两种病原真菌抑制作用.docVIP

生姜提取液对两种病原真菌的抑制作用 　　摘 要 以串珠镰刀球菌、禾谷镰刀菌两种病原真菌为供试菌种，采用菌丝生长速率法研究了生姜提取液对两种病原真菌的抑制作用。结果表明：生姜提取液对串珠镰刀菌和禾谷镰刀菌有一定的抑制作用，随着生姜提取液浓度的增加，抑菌率出现先升后降的趋势，对串珠镰刀菌的最适抑菌浓度为80%，对禾谷镰刀菌的最适抑菌浓度为40%；生姜提取液对串珠镰刀菌的抑制效果明显高于禾谷镰刀菌 关键词 生姜；镰刀菌；抑菌率 中图分类号 R9 文献标识码 A 文章编号 1674-6708（2016）172-0188-02 串珠镰刀菌（Fusarium moniliforme）和禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）是农作物中常见的非专性、非宿主特异性病原真菌，无性时期属半知菌亚门，有性时期属子囊菌亚门。镰刀菌可在土壤中越冬越夏，侵染多种植物，引起植物的根腐、茎腐、花腐和穗腐等多种病害，寄主多达100余种，侵染植物的维管束系统，破坏植物的维管束，并产生毒素，造成作物萎蔫甚至死亡，影响了作物的产量的品质[ 1 ]。串珠镰刀菌产生的一种水溶性代谢产物-伏马菌素还可引起马脑白质软化症、猪肺水肿及大鼠肝癌等各种疾病[ 2 ] 近年来，随着人们生活质量的提高和环保意识的增强，化学药物防治病虫害得到限制，而开发稳定、安全、污染少的天然植物源农药-生物农药成为研究热点[3]。植物源农药的活性成分是植物的次生代谢物，主要有机化学成分为生物碱、酚类、萜类等物质，这些成分具有生物活性，对病原菌有一定的抑制作用[4]。孟昭礼等从银杏提取液中分离出对植物病原菌有较高抑制活性的天然化合物，并仿生合成了系列杀菌剂[ 5 ]；王帅等研究了药用植物提取液对草莓灰霉病的抑菌活性，发现药用植物五味子提取液抑菌效果较好[ 6 ]；程智慧等研究了大蒜秸秆水浸液的抑菌作用并对其抑菌成分进行了初步的研究[ 7 ]；喻大昭等研究了植物源粗提取液对黄瓜灰霉病原菌的生物活性，得出油茶和辣蓼的粗提取物对灰霉病抑制效果较好[8] 生姜是姜科多年生草本植物，可作为药用和食用植物，在我国具有悠久的历史和重要的使用价值。本实验以河南省商丘地区种植的植物生姜提取液为研究对象，采用菌丝生长速率法研究了不同浓度的生姜提取液对串珠镰刀球菌、禾谷镰刀菌两种病原真菌的抑菌活性，以期为进一步的抑菌活性物质分析及生物农药的开发奠定基础 1 材料与方法 1.1 材料 串珠镰刀球菌、禾谷镰刀菌由植物与微生物互作河南省高校重点实验室提供；生姜为河南省商丘地区广泛种植的姜 1.2 方法 1.2.1 提取液的制备 取生姜200g，洗去泥沙去皮，切成小块，放入压汁机里压出汁液，纱布过滤，弃掉滤渣，收集滤液（100%）。将滤液（100%）用无菌水稀释成浓度分别为20%、40%、60%、80%的稀释液备用 1.2.2 培养基的制备 配制PDA培养基（马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，补水至1000mL），高压灭菌后，倒平板。培养基凝固后，采用平板加入法，分别取20%、40%、60%、80%和100%不同浓度的生姜提取液1mL于培养基中，涂抹均匀，备用；加等量的无菌水为对照组 1.2.3 抑菌率的测定 分别接种串珠镰刀菌和禾谷镰刀菌于PDA培养基中，培养7～8天。采用打孔器于串珠镰刀菌和禾谷镰刀菌的菌落边缘取直径6mm的菌饼，置于平板中央，菌丝向下，于28℃培养箱中培养。采用十字交叉法测量培养第4天、5天、6天的菌落直径，并计算抑菌率。每个处理重复3次 菌丝生长抑制率（%）=[（对照菌落直径―处理菌落直径）?M（对照菌落直径―菌饼直径）]×100% 2 结果与分析 2.1 生姜提取液对两种植物病原菌生长的抑制作用 从表1可知，随着生姜提取液浓度的增加，菌丝抑制率增加，80%的生姜提取液对串珠镰刀菌的抑制率最高，为75%；而100%的生姜提取液对串珠镰刀菌的抑制率则有所下降，为67%；随着培养时间的增加，第5天、第6天测得的抑制率均比第4天的抑制率降低，可能是随着时间的增加生姜提取液成分的生物活性有所下降 从表2可知，随着生姜提取液浓度的增加，菌丝抑制率出现先增加后下降的趋势，40%的生姜提取液对串珠镰刀菌的抑制率最高，为60%，80%、100%的生姜提取液对串珠镰刀菌的抑制率分别降低为33%、25%；随着培养时间的增加，第5天、第6天测得的抑制率均比第4天的抑制率降低， 2.2 不同浓度生姜提取液对两种镰刀菌生长抑制率的分析 对不同浓度下生姜提取液对培养第四天两种镰刀菌的的菌丝生长抑制情况见图1；对两种镰刀菌菌丝生长抑制率比较分析见图2。由图2可知，生姜提取液对两种镰刀菌的菌丝抑制率随着浓