常用培养基配置.pptVIP

常用培养基的配制 泰兴市人民医院检验科微生物室 刘鸿丽 培养基的种类 1.按物质组成 ① 天然培养基 ② 半合成培养基 ③ 合成培养基 2.按物理性状 ① 液体培养基 ② 半固体培养基（0.2%---0.5%琼脂） ③ 固体培养基 （1.5% ~ 2.0%琼脂） 培养基的种类 按用途 基础培养基 营养培养基 鉴别培养基 选择培养基 厌氧培养基 1.培养基的制备 1.调制与溶解 2.调节pH 3.过滤澄清 4.分装 5.灭菌 6.质量检查 7.保存 培养基的调配与溶解 调配：先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水，按培养基的配方准确称取各成分，混悬于蒸馏水中，然后用剩余的水冲洗瓶壁。 溶解：将各成分混匀于水中，加热至各成分均溶解溶解过程中应随时搅拌。 培养基制备 培养基的PH调节 培养基PH是细菌生长繁殖的重要条件。由于不同细菌对PH的要求不同，所以不同培养基所需PH不同。一般培养基PH为7.2～7.6，也有酸性或碱性培养基。培养基经高压灭菌后，PH降低0.1～0.2，调PH时应高于所需PH0.1～0.2。具体方法有PH试纸法、电子PH计法和比色法等。 培养基的制备 培养基的分装与灭菌 分装：根据需要将培养基分装于事先洗净的适宜容器中。其分装量最多不超过容积的二分之一。培养基分装后，用清洁的塞子塞好，并用纸包扎后灭菌。有些培养基需高压后再进行分装，此时必须采用无菌操作方法，用前应作无菌检查。 灭菌：高压蒸汽法灭菌是目前最可靠的方法。培养基的灭菌温度和时间，随培养基的品种、装量和容器的大小而定。 培养基的制备 培养基的检定 一般性状检查：颜色、透明度、PH等。 无菌试验 效能试验：使用标准菌株，观察其生长繁殖和生化反应情况。 培养基的制备 一、麦康凯琼脂 【用途】 用于分离革兰氏阴性杆菌 【配制方法】 称取购买的梅里埃公司的麦康凯琼脂粉 g溶解于400ml蒸馏水中，经高压灭菌后（121℃15分钟）冷却至50℃，倾倒平板，冷却后，放冰箱保存。 【质量控制】 选择性生长：大肠埃希菌ATCC25922 生长 红色混浊菌落 伤寒沙门菌ATCC14028 生长 无色透明菌落 福氏志贺菌ATCC12022 生长 无色透明菌落 二、 SS琼脂 【用途】 用于分离沙门菌和志贺菌 【配制方法】 称取购买的梅里埃公司的SS琼脂粉 g溶解于400ml蒸馏水中，煮沸待完全溶解，冷却至50℃，倾倒平板。冷却后，放冰箱保存。 【质量控制】 选择性生长： 大肠埃希菌ATCC25922 部分抑制生长 红色混浊菌落 伤寒沙门菌ATCC14028 生长 中心黑色菌落 三、沙保弱琼脂 【用途】 用于分离真菌 【配制方法】 称取购买的梅里埃公司的沙保弱琼脂粉 g溶解于400ml蒸馏水中，经高压灭菌后（121℃15分钟）冷却至50℃，倾倒平板，冷却后，放冰箱保存。 【质量控制】 选择性生长： 白色念珠菌ATCC10231 生长 大肠埃希菌ATCC25922 生长 部分或完全抑制 四、双糖 【用途】 用于鉴定细菌分解葡萄糖和乳糖的试验。 【配制方法】 称取购买的梅里埃公司的双糖琼脂粉 g溶解于500ml蒸馏水中，煮沸待完全溶解，分装试管，每管约4ml，塞上塞子，包装后高压灭菌（121℃15分钟） 后取出，放置斜面，冷却后，放冰箱保存。 【质量控制】 质控菌 ATCC25922 大肠埃希菌 A/A ATCC27853 铜绿假单孢菌 K/K 阴沟肠杆菌 K/A 奇异变形杆菌　K/H2S 五、半固体 【用途】 用于观察细菌的动力。 【配制方法】 称取购买的梅里埃公司的半固体琼脂粉 g溶解于400ml蒸馏水中，煮沸。待完全溶解，分装试管，每管约2-3ml，塞上塞子，包装后高压灭菌（121℃15分钟）后取出，冷却后，放冰箱保存。 【质量控制】 质控菌 阳性对照 ATCC27853 铜绿假单孢菌 阴性对照 　　　　 肺炎克雷伯菌 培养基制备的注意事项 1.在调配溶解培养基成分时