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侧脑室注射 一、大鼠侧脑室注射（需定位器） SD大鼠，侧脑室的坐标是以前囟点为中心定好坐标，旁开1.5mm，向后囟方向1.1mm ，深4.5mm。 一、实验器具和药品 （一）器具 小号的注射用针头（外径为0.7mm,内径为0.5mm,要磨平，磨光滑，长度大概为1cm，中间套有一小的塑料垫片，以便固定），不锈钢的细铁丝（长度大概为1.2-1.5cm，要求与小号针头的内径相一致，用作导管外的塞子，外面套有与小号的注射用针头粗细一致的塑料，用作塞帽，便于打开），小号螺钉（固定用）和螺丝刀，剪毛剪，镊子，眼科剪（镊），手术刀片（柄），小号注射器，注射针头，烧杯，铝饭盒，手术灯，墨水（作标记），棉签，酒精棉球 （二）药品 生理盐水，青霉素，戊巴比妥钠，H2O2，502胶水，义齿基托树脂，义齿基托树脂液II型 二、实验动物 健康的成年大鼠，体重在170-200g，动物手术前在实验室条件下适应性饲养1周，并于手术前称重，以确定麻醉剂用量。 三、实验步骤 （一）、麻醉 麻醉剂为戊巴比妥钠溶液，浓度为20mg/ml，腹腔注射。体重在170-200g的成年大鼠，注射剂量为0.65ml/只，即可保证整个实验过程动物一直安静。 （二）、固定 1、在一水平桌面上，水平调整好立体定向器（江弯I型C），包括水平上的左右2根钢针、前面的牙齿固定针以及上方的钢针部分。要求左右2根钢针在一水平线上，左右距离一致，牙齿固定针部位水平，与左右2根钢针在一水平面上，并且与左右2根钢针的尖端连接处形成一个等边三角形。上方钢针保持垂直，其尖端处与牙齿固定处以及2耳蜗连线的中点在同一个竖直平面上。立体定向器的中空部分用一个空的形状适宜柔软的纸盒垫平，位置与底座左右2根坐杆齐平。 2、将已麻醉的动物（大鼠）水平并以俯卧的姿势置于盒子的上方，并使水平上的左右2根钢针的尖端刚好对准耳蜗，先将牙齿卡好，然后慢慢的旋紧水平钢针，使之尖端缓缓的伸进耳蜗（一边一边进行），直至松紧适宜，整个头颅水平固定，不能摇动为止（可从定向器前方察看）。 （三）、安装步骤 1、在头颅的正中部位术野处剪毛，大小适宜，用酒精棉球搽拭，消毒后，以左右耳蜗的连线为基线（稍微向前一点点），以头颅中轴为方向，沿头部用刀片切开一小切口（0.5-1cm左右），深度适宜（先只需切开皮肤，切勿伤及颅盖），用棉签蘸去流出的少量血液，然后用眼科镊（剪）轻轻挑起并剪开皮下筋膜，并稍微做钝性分离，直至暴露颅盖，用棉签蘸去流出的少量血液。 2、 用棉签蘸取适量的10% H2O2，在颅盖表面轻轻搽拭，消毒。 3、确定安装导管的位置。导管安装在侧脑室（单侧）。解剖位置为：前骨缝的交点处即前囱沿着中骨缝向后0.8mm，然后水平离中骨缝靠右1.5mm的位置。 4、先用大号的注射针头（尖端蘸点墨水，好做标记）在前囱的位置处做一标记（打一小孔眼），然后在定向器上方钢针的顶端安上一小的锋利的注射针头（尖端蘸点墨水，好做标记），并调整好位置，使针头慢慢的靠近前囱的位置，待吻合后，然后微调定向器上方的旋钮（前后刻度刚好和导管安装的位置相吻合），使上方钢针上的针头的位置刚好对准导管安装处的位置，然后微调定向器最上方的旋钮，使上方钢针上的针头慢慢靠近导管安装位置，并在导管安装位置上打一小孔眼，同时也作好导管安装处的标记。然后慢慢的移去针头，但是上方钢针的位置已经调整好了，切勿移动。 5、用一钝性针头在先前已经作好标记的前囱的位置处先钝性扩大一下孔眼，然后将一细小的螺钉，沿着孔眼慢慢的旋转使之进入适宜的深度后，用502胶水将螺钉固定在颅盖上（螺钉最好是垂直固定）。同时，用一钝性针头在先前已经作好标记的安装导管的位置处先钝性扩大一下孔眼，以便导管容易进入。 6、将事先已经磨好的并且已经安上相匹配塞子的导管安装在定向器上方钢针的顶端，固定好后，慢慢的旋紧旋钮，使导管顶端慢慢的接近导管安装的位置，待位置吻合后，慢慢的旋紧定向器最上方的旋钮，使导管最顶端慢慢的伸入侧脑室，直至到达侧脑室位置（大概在颅骨以下4.5mm处），松紧适宜。 7、倒取适量的专用固定剂于一小瓶盖上（义齿基托树脂，上海二医张江生物材料有限公司，电话021，然后滴加适量的义齿基托树脂液II型（自疑牙托水，上海二医张江生物材料有限公司），混合均匀后，用钝针头慢慢吸取树脂液，均匀涂于刚安装上的导管的周围，以及前囱位置上的螺钉的周围，使之相互粘连和固定。 8、慢慢的旋开定向器上方钢针侧边的旋钮，使之与导管松开，然后慢慢的旋转定向器最上方的旋钮，使之与导管脱离后，移开。此时，导管外端完全暴露，然后在导管的周围均匀涂上树脂液，厚度适宜，并且使之与周围的皮肤粘合完整，封闭，自然晾干。（在这个过程中，一定要保证导管没有摇动，否则导管进口处可能不封闭） 9、吸取适量的青霉素溶液（约0.2ml）