一阶导数光谱法同时测定Cervitec凝胶剂中 醋酸氯己定和麝喷鼻草酚.doc

一阶导数光谱法同时测定Cervitec凝胶剂中 醋酸氯己定和麝香草酚 　【黑龙江虹桥医院】Cervitec是一种治疗和保护牙本质过敏的制剂,主要成分为醋酸氯己定和麝香草酚,治疗作用主要源于醋酸氯己定和麝香草酚对牙表面敏感菌群的抑制,抑菌作用的强弱与涂剂释放的药物浓度有关[1],分析Cervitec涂剂中醋酸氯己定和麝香草酚对于其质量控制有一定意义。关于醋酸氯己定或麝香草酚的分析方法,文献报道有高效液相色谱法、电化学法、气相色谱法和毛细管电泳法等[25]。笔者通过研究醋酸氯己定和麝香草酚的紫外吸收光谱及一阶导数光谱特征,选择醋酸氯己定的“穿零”波长230 nm,麝香草酚“穿零”波长274 nm,作为二者的测定波长,建立同时分析醋酸氯己定和麝香草酚含量的一阶导数分光光度法。 　　1材料与方法 　　1.1材料醋酸氯己定和麝香草酚标准品(中国药品与生物制品检定所)。Cervictec凝胶剂(批号:CE0123,标示量:1%醋酸氯己定和1%麝香草酚,福建医科大学附属口腔医院提供)。Cervictec阴性对照制剂(按Cervictec处方自制,制备时不加醋酸氯己定和麝香草酚);其他试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水。醋酸氯己定和麝香草酚标准储备液:精密称取醋酸氯己定和麝香草酚标准品各50 mg,分别用异丙醇2 mL溶解,蒸馏水稀释至50 mL。 　　紫外分光光度计(752PC，上海光谱仪器有限公司),配备1 cm比色皿。扫描波长间隔2 nm。 　　1.2方法 　　1.2.1标准曲线绘制分别精密量取醋酸氯己定和麝香草酚标准储备液5 mL,置同一25 mL容量瓶中,混匀,加水稀释至刻度备用。分析前,将上述混合溶液适当稀释,使溶液中醋酸氯己定和麝香草酚含量分别在3~30 μg/mL和5~30 μg/mL。分别以230 nm和274 nm作为分析波长,测定相应波长处溶液的一阶导数分光度值(dA/dλ),以其为纵坐标,并相应以麝香草酚和醋酸氯己定浓度c为横坐标,绘制标准曲线。 　　1.2.2同时测定Cervitec凝胶剂中醋酸氯己定和麝香草酚取Cervitec凝胶剂0.1 g精密称定,置50 mL烧杯中,40 ℃水浴加热30 min。挥干溶剂后,加异丙醇2 mL溶解残渣,加水稀释,移入25 mL容量瓶,蒸馏水定容,过滤,取续滤液2 mL,加水稀释成10 mL即制成样品溶液。分别记录溶液在230 nm和274 nm波长处的dA/dλ,根据标准曲线,求得醋酸氯己定和麝香草酚浓度,即可计算出样品中二者含量。 　　2结果 　　2.1测定波长扫描麝香草酚和醋酸氯己定的一阶导数光谱(图1),发现在波长230 nm处,麝香草酚的dA/dλ(简称为D值)较大,且此波长处醋酸氯己定的D值为零(穿零点);当波长为274 nm时,醋酸氯己定的D值较大,此时麝香草酚的D值为零。因此选择230 nm和274 nm分别作为麝香草酚和醋酸氯己定的dA/dλ测定波长,以消除二者的相互干扰。 　　2.2溶剂醋酸氯己定和麝香草酚在水中微溶,在thymol:麝香草酚; ChA:醋酸氯己定; NS:阴性对照品; RB:溶剂空白. 表2Cervitec凝胶剂回收率配制溶液时应选择合适的溶剂。分别考察醋酸氯己定和麝香草酚在乙醇和异丙醇中的溶解性,前者在上述2种溶剂中均易溶解,后者在异丙醇中溶解性较好。实验选取异丙醇作为醋酸氯己定和麝香草酚的溶剂。考虑到实验的简洁与试剂的耗损,可先用少量异丙醇溶解样品,然后用二次蒸馏水稀释至所需体积。 　　2.3标准曲线配制分别含3.0,5.0,7.0,10,15,20,25,30和35 μg/mL的醋酸氯己定与麝香草酚对照品混合溶液,测定其一阶导数光谱图(图2)。分别记录溶液在230 nm和274 nm波长处的D,绘制标准曲线。醋酸氯己定在3~30 μg/mL呈良好线性关系,其线性方程为D=0.0014c0.0003(r=0.9991);麝香草酚在5~30 μg/mL呈良好线性关系,方程为D=0.0017c+0.002(r=0.9993)。分别对5 μg/mL麝香草酚和3 μg/mL醋酸氯己定进行5次平行测定,其相对标准偏差分别为0.5%和0.8%。 　　2.4精密度实验配制分别含5.0,15和30 μg/mL的醋酸氯己定与麝香草酚对照品混合溶液,分别在同一天内5个时间段和连续5 d内,按照1.2.1标准曲线绘制的测定条件测定各溶液中二者浓度,计算其日内与日间精密度(表1)。表1不同浓度混合溶液日间、日内精密度 　　2.5回收率取Cervitec凝胶剂适量根据其标示表2Cervitec凝胶剂回收率 　　2.6样品分析应用所建立的双波长等吸收紫外分光光度法对Cervitec凝胶剂进行含量分析,含醋酸氯己定1.06%,含麝香草酚1.03%。该结果与Cer