微生物试验功课.docVIP

牛肉膏蛋白胨培养基属于何种培养基？ 属于天然培养基。 培养基配制完成后，为什么必须立即灭菌？若不能及时灭菌应如何处理？已灭菌的培养基如何进行无菌检查？ ①培养基配置完成后就具备了营养功能，在空气中会有很多孢子等落进去，如果放的时间长了，等微生物生长了，营养成分就降低了，而且营养结构也变化了。再就是有些特殊的培养基，里面各种物质不灭菌也就是不加热的话，彼此反应，这样就达不到最后的营养结构了。 ②培养基不及时灭菌，一般就不能再用了，你可以倒进垃圾桶或者指定的地方，也可以把它灭菌后用于比较低级的微生物培养。 节约起见，做肥料了啥的都可以啊。 ③通常是放在37℃的恒温箱中一两天后 培养基上没有生长任何微生物的就可以使用（若有微生物则是以菌落出现的 肉眼可以看见的）。 为什么湿热灭菌比干热灭菌法更有效？ 热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强。水分子的存在有助于破坏维持蛋白质三维结构的氢键和其他相互作用弱键，更易使蛋白质变性； 热蒸汽比热空气穿透力强，能更有效地杀灭微生物； 蒸汽存在潜热。当气体转变为液体时可放出大量热量，故可迅速提高灭菌物体温度。 高压蒸汽灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽？灭菌完毕后，为什么待压力降低到“0”时才能打开排气阀，开盖取物？ 因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度，所以要先将冷空气排尽。 如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。 从周围环境中微生物的观察，你认为无菌操作应注意什么？ ①使用前超净工作台开15分钟紫外线； ②注意开通风； ③使用的器皿注意消毒； ④操作时戴无菌手套或并用75%酒精消毒； ⑤操作时尽量靠近酒精灯火焰。 3、划线分离时，为什么每次都要将接种环上多余的菌体烧掉？划线为何不能重叠？ 防止杂菌污染,提高培养纯度。 所谓的平板划线分离法是通过划线将菌液不断稀释，最终实现单个细菌生长成为单个菌落从而进行分离。如果重叠了稀释就无从谈起了，划线用的菌液也不是越多越好。 4、培养时为什么要将培养皿倒置培养？ ①倒置好拿，不会出现拿平板时盖子和底分开的情况，避免染菌。 ②若正置，盖上的水珠会掉落，污染群落。 ③倒置培养，水珠少，便于正面观察。 1、涂片为何要固定？固定加热时间过长绘怎么样？ 未经加热，水分蒸发太慢，制片时间过长；加热温度过高或时间过长会导致菌体变形或形态破坏。 使用油镜时，为什么必须用香柏油？ 增加照明度；增加数值孔径（显微镜的放大效能由其数值孔径决定）。 镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？ 用低倍镜方便调焦，而且物镜离样品比较远，不会碰坏物镜或者样品。低倍镜焦距对了，转化到高倍镜焦距也一般不会变太多，只要细调一下就可以了。