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医学免疫学实验课 免疫学教研室 李宗喜 5346 第一部分 体液免疫实验 实验一 对流免疫电泳 凝集实验 动物免疫 对流免疫电泳操作步骤 1.打孔：用直径3mm的打孔器成对打孔，孔距 为8-10mm。 2.加样：用微量加样器将10μl（勿溢出）待 检血清加在阴极（右侧）侧孔内，兔抗人 IgG血清加到阳极（左侧）侧孔内。 3.电泳2.5h。 8mm + - 左 右 兔抗人IgG血清 待检血清 注意事项 打孔无裂缝 孔勿靠近琼脂边缘 加样不溢出 加样无气泡 清洗加样器 要求 准时 白大衣 认真记录 爱惜实验室 水、电、煤气 名单 课堂纪律 两次试验报告 期末考试 免疫实验内容 免疫应答 体液免疫应答 实验一、二、三 抗体的检测 血清抗体的检测 抗体生成细胞的检测 其它的抗原抗体反应 凝集反应 沉淀反应 细胞免疫应答 实验四 腹腔巨噬细胞吞噬功能测定 实验一 体液免疫应答 抗体的检测 其它抗原抗体反应 血清抗体的检测 凝集反应 沉淀反应 动物免疫 ABO血型的鉴定 对流免疫电泳 体液免疫试验流程 动物免疫 血清分离，细胞提取 指标检测 经典抗原抗体反应 沉淀反应：对流免疫电泳 凝集反应：ABO血型鉴定 小鼠抗体水平的检测 抗体生成细胞检测：溶血空斑试验 血清中抗体水平的测定：ELISA 抗原-抗体反应 概念： 体内外发生的高度特异性结合反应， 其结构基础为抗原表位与抗体超变区抗原 结合位点的结构互补。 特点： 特异性 非共价键结合 比例要适当 影响抗原-抗体反应的因素 电解质：0.85%氯化钠 温度：37℃ 酸碱度：pH6-8 沉淀反应 可溶性抗原（如细菌培养滤液、外毒 素、血清蛋白等）与相应的抗体结合，在 一定条件（适量的电解质，