海南大学环境与植物保护学院 李培征 实验五 稠环芳烃的高效液相色谱法分析及柱效能评价 实验讲解要点 一、高效液相色谱法特点和优点 二、高效液相色谱法按分离机制分类 三、反相色谱法及分离原理 四、 HPLC和GC法的比较 五、 高效液相色谱仪的基本组成 与作用 六、高效液相色谱的定性与定量 七、 使用高效液相色谱仪注意事项 八、 实验部分 HPLC有以下特点: 高压-压力可达150~300Kg/cm2。 高速-流速为0.1~10.0 ml/min。 高效-可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 高灵敏度-紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 HPLC与经典液相色谱相比有以下优点: 速度快-通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。 分辨率高-可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。 灵敏度高-紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。 柱子可反复使用-用一根色谱柱可分离不同的化合物。 样品量少,容易回收-样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单 一组分或做制备。 一、HPLC的特点和优点 二、高效液相色谱法按分离机制的不同分为: 液固吸附色谱法 液液分配色谱法(正相与反相) 离子
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