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自来水中细菌总数的鉴定 摘要： 水是生命之源，人的生存离不开水环境，水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用，而判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。良好的饮用水细菌总数因100CFU/Ml,而500CFU/mL则不适宜饮用，我国饮用水卫生标准（GB5749—85）规定每毫升水样细菌总数37℃培养24h不得大于100个，每升水中总大肠杆菌群数小于3个。本实验采用营养琼脂培养基对水中细菌进行培养，通过对菌落的计数从而来测定自来水是否符合饮用水的微生物方面的卫生标准。 关键词： 自来水 细菌总数 营养琼脂培养基 平板菌落计数技术 菌落 0.引言： 微生物学指标是评价饮用水生物性污染的重要指标，是水质在流行病学上安全的保证。水是生命之源，人的生存离不开水环境，水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用，而判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。[1]各种天然水中常含一定数量的微生物。水中微生物的主要来源是：水中的水生性微生物（如光合藻类）、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。自来水指通过水处理厂净化、消毒后生产出来的符合国家饮用水标准的供人们生活、生产使用的水。本实验只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数 1.材料与方法 本次实验于2010年10月27日下午，在太原师范学院微生物实验室进行。 实验前先将培养皿，吸量管，三角烧瓶放入高压蒸汽灭菌锅内，0.1MPa，121℃，20min灭菌。再将营养琼脂[3] [4]与蒸馏水按33g／1000mL配制，将配好的培养基在电炉上煮沸3—5min,冷却备用。 对自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再开放水龙头使水流5min后，用灭菌三角烧瓶接取水样，迅速地进行分析。 用灭菌的吸量管吸取1mL水样，注入小灭菌培养皿中，再倾注约为培养皿1/3高已溶化并冷却到45℃—50℃的培养基，盖上大培养皿，左手持培养皿在桌面作平面旋转摇动，是水样与培养基充分混匀。另取一个小灭菌培养皿，不加水样，倾入等量的培养基，作空白对照。[5] 待培养基凝固后，倒置于37℃，培养24h,进行菌落计数。 2.结果与分析 经过24h的培养，实验培养基上出现了85个菌落，对照培养基出现了0个菌落。所以自来水中细菌总数是85 CFU/mL。 本次实验数据是参考单璐、赵志洁小组的，由于营养琼脂培养基在培养皿中与自来水混匀时有严格的温度限制45℃—50℃，在将培养基分配给单璐组后，培养基温度降低、泡沫增多，导致我组3个培养皿中培养基与自来水无法均匀混合。24h后，培养基上出现菌苔，无法计数，并且培养基上的泡沫也影响计数。如果再对培养基进行加热，会使培养基受到空气中细菌的污染。 3.讨论 在本实验中的有的空白对照培养基上长了细菌菌落，说明此培养基被污染了。通过此实验，我们可知平板菌落技术法是测定水样中细菌个数比较方便的方法，但它也存在不准确的因素比如在数菌落时，菌落太小且又处于培养基内部这样就不能观察到菌落从而影响结果，又如在培养过程中由于细菌之间的相互抑制也会使计数菌落减少。因此，在制作培养基及培养的过程中要严格杀菌，并严格按照实验步骤认真操作，从而使得结果更加精确。［6］ 倒置培养基时应降温至45 ℃，以免温度过高烫死大肠杆菌。切记不能过低，防止培养基凝固。倾注培养基后要将平皿在桌面上做匀速旋转，将培养基和自来水样摇匀，在培养基中观察时可见一些菌苔就是平皿没有摇匀的结果。倾倒完培养基后没有迅速盖上另一个培养基，使空气中的杂菌落入，也会使实验结果受到影响。 本次实验取自来水样时，由于自来水管是塑料的无法用火焰灼烧灭菌，水样可能会被自来水管口的杂菌污染，自来水样置于锥形瓶中暴露在空气中的时间过长，遭空气中的杂菌污染。 由于培养基是倒置的，所以可以观察到绝大多数的细菌着生在培养基表面。这是由于菌种在固体培养基上借助重力作用而形成的，有利于菌落计数。 4.结论 根据国家此自来水中的细菌个数为个，国家标准，故该自来水水质合格。[] 本组实验没成功，出现了菌苔。说明自来水样与培养基没能充分混匀，其原因是因为操作不当，培养基温度过低，以至于培养基一倾倒于培养皿中就立即凝固。 本组实验还出现了泡沫，说明在制造培养基的过程中,加热搅拌容易产生泡沫,而泡沫难于除去倒平皿时泡沫随着培养基各种成分一起进入平皿,这对观察菌落生长扰很大[]。原因是泡沫中有空气，而空气中也含有细菌，其中的细菌在培养24h后，也能产出菌落，从而影响计数。 其他小组的对照培养基上出现菌落，而对照组中的菌落数应为0个。说明在实验操作过程中被污染，主要是因为有杂菌混入，杂菌来源可能：培养皿灭菌不充分；灭菌后在空气中放置又落入杂菌；培养基倾入培养皿后没有立即加盖；配置培养基时反复升降温（没有立