磁珠法回收琼脂糖凝胶DNA.pdfVIP

磁珠法DNA 胶回收试剂盒 Mag-MK Gel DNA Purification Kit 产品编号：SK8743/SK8744 包装规格：50 次/100 次 试剂盒组成 组分 SK8743，50 次 SK8744，100 次 Buffer MB2 30 ml 60 ml PureMag Beads 1.5 ml 3 ml Buffer MGB 30 ml 60 ml Buffer MGW 24 ml 2 ×24 ml TE Buffer(pH8.0) 5 ml 10 ml 操作手册 1 份 1 份 保存方法及注意事项 请将试剂盒中的PureMag Beads 置于2~8°C 保存，其余试剂室温保存，有效期详见包装。 Buffer MB2 中含有刺激性的化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入 口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。 产品介绍 本试剂盒适用于从TAE 和TBE 琼脂糖凝胶中回收100 bp~30 kb 的DNA 片段，回收效率可达70% 。该试剂盒中的纳米 磁珠能够特异性吸附核酸分子，去除其他杂质，得到高质量的DNA 回收产物。所得到的DNA 可直接用于酶切、连接、测序 等后续的分子生物学试验。本试剂盒具有以下特点： 1. 适用范围广，回收效率高，对于100 bp~30 kb之间的DNA片段回收效率在70% 以上，尤其对于长片段DNA片段的回 收，磁珠法比柱式法的回收效率高出20%左右。 2. 操作简单快速，整个回收过程仅须30分钟左右。 3. 无需离心，实现DNA回收的高通量化和自动化。 标准回收步骤 自备材料：磁力架、水浴锅、1.5 ml 离心管和无水乙醇。 按瓶身标签说明在Buffer MGW 中加入相应量的无水乙醇（乙醇终浓度为80% ），混匀后在瓶身做好标记。密封于室温 保存。 Buffer MB2 在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于37°C 溶解沉淀，待冷却至室温后使用。 请提前将水浴锅调至65°C 备用。 1. 通过琼脂糖凝胶电泳尽可能将目的DNA片段与其它片段分开，用干净的手术刀片将含目的DNA片段的琼脂糖凝胶块切 下，放入1.5 ml离心管中，称重。 若胶块重量超过300 mg 及胶浓度1.5%，请将切下的目的胶块放入2 ml 的离心管中。 尽可能多地去掉不含目标DNA 的琼脂糖。 若胶块体积太大，可先将胶块切成小块。 切胶过程尽可能快，减少DNA 在紫外线中的暴露时间以降低对DNA 的损伤。 2. 根据胶块的重量，按每100 mg琼脂糖胶块（如胶块不足100 mg则用水补充至100 mg）加入200 µl Buffer MB2 。 3. 将含有胶块的离心管置于65°C水浴5-10 min，间或混匀，直至胶块完全溶化。 胶块完全溶化即可，过长时间的处理可能导致 DNA 损伤。 4. 取出离心管，若凝胶浓度≤1.5%，加入与Buffer MB2等体积的Buffer MGB和25 μl PureMag Beads ；若凝胶浓 度1.5%，分别加入与Buffer MB2等体积无菌ddH O和Buffer MGB，再加入25 μl PureMag Beads ，吸打混匀，室温静 2 置2 min。 加PureMag Beads 之前，请充分混匀。 请务必将PureMag Beads 加至液面以下，尽量将枪头上残留PureMag Beads 吸打干净。 处理多个样品时，可先将Buffer MGB 与PureMag Beads 按8：1 的体积比混匀，然后向每个离心管中加入225 µl 上述 混合液。 5. 将离心管置于磁力架上3~5 min，待PureMag Beads完全吸至管壁上之后，吸弃上清，从磁力架上取出离心管。 吸弃上清前，若管口