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- 2017-06-02 发布于湖北
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实验八、果蝇基因组DNA的提取 一、实验目的 通过实验掌握动物基因组DNA抽提的操作过程,了解DNA提取的意义。 预备知识 核酸是重要的生物大分子之一,脱氧核糖核酸(DNA)是核酸的一种,DNA是绝大多数生物(除少数RNA病毒外)记录、存储、传递遗传信息的分子。近年来,分子生物学技术迅速发展,在分子遗传学研究领域的诸多方面涉及到抽提基因组DNA的方法。DNA的提取是进行PCR扩增、Southern杂交、限制性片段长度多态性分析等实验的基础。 三、实验材料 新鲜存活的果蝇或-20℃冻存1h的果蝇个体5~10个。 四、实验仪器及用具 器具:玻璃棒、烧杯、离心管、量筒、分析天平、水浴锅、台式高速离心机、4℃冰箱、长玻璃吸管、微量加样器、枪头、紫外分析仪、琼脂糖电泳装置。 五、药品和试剂 酚(Tris饱和酚)、氯仿、异戊醇、十二烷基硫酸钠(SDS)、Tris 碱、乙二胺四乙酸(EDTA)、异丙醇。 溶液配制: 消化缓冲液:含100mM的Nacl,10mM Tris.cl(PH8.0), 25mM的EDTA(PH8.0), 0.5%的SDS。 TE缓冲液(PH8.0):含10mM Tris.cl(PH8.0),1mM的EDTA(PH8.0)。 电泳缓冲液TAE: 电泳缓冲液(50×TAE):取Tris24.2g ,冰醋酸 5.7ml,0.25mol/L EDTA (pH8.0)20ml ,
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