基因工程5重组子筛选中国药科大学生物工程所有课件.pptVIP

DNA的体外重组 获得转化子仍然是多种类型的DNA分子 1 连接产物中既有载体和一个或多个串联目的基因的连接； 2 也有载体自连； 3 还有目的DNA分子自连； 4 更多的是未发生连接反应的载体和目的DNA片段 pBR322抗菌素标记选择原理 pUC18/19 IPTG诱导的结果： 2、 根据插入基因的遗传表型筛选 DNA电泳检测法 2.酶切电泳筛选法 二、分子检测法 PCR扩增检测 分子杂交检测 PCR扩增检测法 （1）菌落印记原位杂交筛选 (3)Northern blotting 五.免疫化学检测法 2. 放射性抗体检测法过程 (2). Broome-Gilbert双位点检测法 (3).免疫沉淀检测法 (4).酶联免疫吸附测定（ELISA） 2. ELISA检测的一般步骤 二抗结合： 3.ELISA的局限性 临床检验常用的单抗 (5).免疫印迹（western blotting）法 ② 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）： ③蛋白质电泳的分子量标准 ④凝胶中的蛋白质染色： 2）Western blotting Western装置 ② Blotting ③ Blotting过程 ④结果 六、转译筛选法 2.转译筛选 3.杂交抑制转译法 2. 过程 4.杂交释放转译法 过程 5.DNA-蛋白质相互作用筛选法 一般克隆与筛选策略 七、几种常用的真核生物重组基因选择方法 ②