抗人羧酸酯酶Ⅱ多克隆抗体的制备、鉴定与应用.pdfVIP

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2017-06-03 发布于福建
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抗人羧酸酯酶Ⅱ多克隆抗体的制备、鉴定与应用.pdf

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158 ·论著· 抗人羧酸酯酶一Ⅱ多克隆抗体的制备、鉴定及应用吴春铃，包红霞，唐晓波，朱大岭拳(哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室，黑龙江省生物医药工程莺点实验室一省部共建闻家匿点实验室培育基地，药物与内源性物质代谢省高校重点实验室，黑龙江哈尔滨150081) and afoundationforthe of and specificitylays investigationdiag- Preparation，characterizationap- nosiskitofIivercancer． of plicationpolyclonalantibodyagainst [Keywords]hCE-Ⅱ；prokaryoticexpress human protein；polyclonal carboxylesterases-II antibody [摘要]目的：构建人羧酸酯酶．Ⅱ(hCE一Ⅱ)原核表达质粒 WU Xiao—bo，ZHU Chun—ling，BAOHong—xia，TANG 并在大肠杆菌中表达，制备多克隆抗体(pAb)，并对其特性 Da．1ing+ 进行初步鉴定。方法：以人正常肝eDNA文库为模板，构建 of Labof BiopharmaeeuticalDepartment，CollegePharmacy，Key of La- Province，Key BiopharmaceutiealEngineeringHeilongjiang of and SubstanceMetabolismof boratory Endogenous Higher Drug 达，hCE—II-GST融合蛋白作为免疫原免疫大耳白兔，用辛酸． Institutionof Learning HeilongjiangProvince，Harbin150081，硫酸铵分步沉淀法初步纯化抗血清，并用问接ELISA、West． China elTl blot及免疫组化检测抗体的灵敏度和特异性。结果：成功制备了抗hCE—lI的多克隆抗体。Western constructa ex- blot鉴定表明该抗 AIM：To [Abstract] prokaryoticplasmid human the 体可特异性识别重组蛋白以及天然的人肝微粒体蛋白。免疫 pressingcarboxyles—terases·11(hCE-11)，purify recombinantand therabbit an— 组织化学鉴定显示该抗体町特异性结合肝