发光底物试剂盒说明书幻灯片.pdf

GE Healthcare 数据文件28-9857-23 AA 蛋白印记试剂 A me rs ha m™ EC L™ Prime 蛋白印迹试剂 自从1990年进入市场以来，增强化学发光 （ECL ）蛋白印 记系统产品库不断丰富，以适应从常规蛋白检测到采用基 于荧光Amersham ECL™ plex进行多道分析的各种应用。通 过选择EC L检测系统，研究人员不仅可以避开对人有危害 的放射性同位素操作，同时还拥有了另外的分析工具，正 是由于这种分析具有一次性的特点，使得蛋白分析比以前 变得更加快速，更加敏感，也更加地灵活。 Amersham ECL家族最近加入的成员是ECL prime，它至少 具有ECL plus两倍的敏感性，其最低检测限 （LOD）可达低 皮克量级。该试剂的特点在于大幅增加了信号的稳定性， 这使得反复曝光变成可能，并使其能在一个试验中轻松地 进行多个印记处理。此外，ECL prime所发射的信号强度提 高了3到5倍，这也就意味着ECL prime也采用比ECL plus低3 倍的一抗和二抗进行检测，这不仅降低了背景，并使抗体 试剂的费用得到降低。 ECL Prime保留并增强了Amersham ECL plus和Amersham ECL Advance™ 的优势，提供出一套敏感、稳定、在很宽蛋 图1. Amersham ECL Prime ：GE Healthcare的一种新的、高灵敏化 白动态水平范围内能精确定量并在节省昂贵的抗体试剂成 学发光蛋白印记试剂。 本的检测系统： •信号强度高且灵敏，允许使用高度稀释的一抗和二抗而 •最适合于ImageQuant™ LAS 4000 （CCD成像）成像，也 不降低灵敏度 可与Amersham Hyperfilm匹配使用 •信号稳定，可重复曝光，非常适合大量实验的开展，客 •可与Rainbow™分子量标准和Amersham ECL Dualvue™蛋 户可以从容地安排实验和检测之间的时间 白印记标准配合使用 •最适合选用Amersham Hy bond™-P （PV DF）膜，也可使 用Amersham Hybond-ECL （硝酸纤维）膜 Amersham ECL Prime在蛋白免疫印迹中的应 用 e EC L Prime主要在蛋白免疫印迹流程的检测阶段发挥作用 m i r P L C E （图3 ），同时对上游的步骤也有一定的影响。比如，ECL Prime作为检测方法时可以采用高度稀释的一抗作为与免疫 印迹膜杂交的探针。这不仅在经济上非常合适，也避免了 背景信号下淹埋的与目的蛋白之间的较弱特异结合。 HRP EC L的高灵敏度要求其不仅能封闭非蛋白结合位点，并且 能被清洗步骤彻底清除。