05第六章酶、细胞、原生质体固定化解读
第六章 酶、细胞、原生质体固定化 直接应用酶的不足之处 酶的稳定性差 一次性使用 分离纯化较困难 固定化酶的优点 酶的稳定性明显改善; 酶的利用效率高; 易于分离纯化; 反应条件易于控制; 适合于多酶催化反应。 第一节 酶固定化 固定化酶制备原则 (1)维持酶的催化活性及专一性; (2)有利于生产自动化、连续化; (3)应有最小的空间位阻; (4)酶与载体必须结合牢固; (5)应有最大稳定性,载体不与废物、产物或 反应液发生化学反应; (6)成本要低。 酶的固定化方法(一) 酶固定化方法示意图 1、吸附法(link) 2、包埋法(link) 3、结合法(link) 4、交联法(link) 5、热处理法(link) 1、吸附法 通过氢键、疏水作用和π电子亲和力等物理作用,将酶固定于水不溶载体上,从而制成固定化酶。 固体吸附剂:活性炭、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃等; (1)操作简单,条件温和,不会引起酶变性失活,载体廉价易得,可反复使用; (2)物理吸附结合能力弱,酶与载体结合不牢固易脱落. 2、包埋法 包埋法是将聚合物的单体与酶溶液混合,再借助于聚合助进剂(包括交联剂)的作用进行聚合,酶被包埋在聚合物中以达到固定化。 多孔载体琼脂、海藻酸钠、角叉菜胶、明胶、聚酰胺、火棉胶等 2、包埋法 ①聚丙烯酰胺凝胶包埋法。 一般的制备过程如下:将1ml溶于适当缓冲液的
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