第二章代谢控制发酵的基本思想.ppt

代谢控制发酵 Chapter 2 代谢控制发酵的基本思想 第一节 微生物细胞的调节机制 一、微生物细胞的代谢调节的主要举措 1.?酶活性的调节 2.?酶合成的调节 3.细胞膜透性的调节 三、酶活性的调节 酶活性的调节是指一定数量的酶，通过其分子结构的改变来调节其催化反应的速率。是微生物饥饿情况下的一种经济的调节模式，比酶的合成迅速及时而有效。 酶活性调节的影响因素 （1）底物和产物的性质和浓度 （2）环境因子（如浓度、压力、pH、离子强度和辅助因子等）以及其它酶的存在都有可能激活或抑制酶的活性。 （一）激活 在激活剂的作用下，使原来无活性酶转变的有活性或使原来活性低的酶酶活提高。这种现象称为激活或活化。凡能提高酶活性的物质称为激活剂。 属于代谢调节的激活作用主要是指代谢物对酶的激活，这类激活作用主要有两种。 （二）抑制 抑制与激活相反，由于某些物质的存在，降低酶活性，称为抑制。抑制可以是不可逆的，这将造成代谢作用的停止；也可以是可逆的，即当抑制剂除去后酶活性又恢复，在代谢调节过程中所发生的抑制现象主要是可逆的，而且大多属于反馈抑制。 酶活性调节机制 酶活性调节机制有多种理论解释，主要有: （1）别构（变构）调节理论（其核心是酶分子构象的改变） （2）酶分子的化学修饰理论（其核心是酶分子结构的改变） （3）其它调节机制 （一）别构（变构）酶调节 别构（变构）效应是指一种小分子物质与一种蛋白质分子发生可逆的相互作用，导致这种蛋白质的构象发生改变，从而改变这种蛋白质与第三种分子的相互作用。变构蛋白质是表现变构效应的蛋白（例如阻遏蛋白），具有变构作用的酶称为变构酶。 1、别构（变构）酶的结构和特性： （1）别构酶是含多个亚基的四级结构的蛋白质（一般为四聚体），亚基的结构和功能可以相同，也可以不同。 （2）别构酶分子中含有两个中心，即活性中心和调节中心，它们在空间上是分开的，可以在不同的亚基上，也可以在同一亚基的不同部位上。 （3）每个别构酶的分子可以结合一个或多个配体（底物或效应物）理论上结合底物的最大数目与催化中心的数目相等。结合效应物的最大数目应与调节中心的数目相等。 2、别构（变构）酶的作用程序： 专一性代谢物与变构部位结合 酶分子构象变化 活性中心修饰 抑制或促进酶活性 3、变构酶活性调节类型（模型） 4、变构酶的反应动力学性质 变构酶的反应动力学不同于普通酶的，它不符合米氏动力学方程式。 普通酶反应速度和底物浓度的关系为： V=（Vmax[S]）/（Km+[S]） 变构酶反应速度和底物浓度的关系为： V=（Vmax[S]）n/（Km+[S]n） V：酶促反应速度，Vmax：最大反应速度， S：底物浓度，Km：米氏常数，n：亚基数 变构酶的反应速度与底物浓度（或变构抑制剂的浓度）的关系曲线呈S型，有协同性；当底物或效应物浓度极低时，酶反应速度的变化极微小，这是因为效应物浓度极低时，不具有协同性，当效应物浓度超过某个水平（阈值）时酶反应速度急剧增大（减小）。即存在着底物或效应物对反应速度发生影响的阈值。这在代谢控制上具有很大的生理意义。 5、变构酶调节的实例 图2－4 异亮氨酸和苏氨酸对苏氨酸脱氨酶活性的影响 6、变构酶的脱敏作用（desensitingation） 变构酶经特殊处理后，不丧失酶活性而失去了对变构效应物的敏感性，称为脱敏作用。 可通过许多方法：加热处理、0—50C低温处理、化学试剂（汞盐、对氯汞苯甲酸（PCMB）、尿素等）、透析、X射线照射、蛋白酶有限水解、pH的改变等等。 （1）使变构酶解聚： 可利用上述物理、化学等方法处理变构酶，可使变构酶多聚物解聚导致对效应物脱敏，失去调节功能。 （2）基因突变： 为变构酶编码的结构基因的突变可引起脱敏，如诱变育种获得抗类似物突变株中多发生这种变化，在氨基酸的核苷酸发酵育种上，已作为突破微生物代谢控制的一个重要手段利用。 7、变构酶调节的特征： Monod，changcux与Jacob认为变构酶调节有以下特征： （1）参加与酶活性调节的变构因子是一类能与变构蛋白分子互补结合的小分子化合物，又称为效应物或调节性分子（通常这些效应物在结构上