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超声波辅助提取大豆异黄酮课件
超声波辅助提取大豆异黄酮;目录:
1.解释
2.摘要
3.绪论
4.实验过程
5.结果与讨论
6.结论
;1.什么是大豆异黄酮;2.什么是超声波辅助提取;二、摘要;三、绪论;四、实验过程;提取大豆异黄酮
进行高强度超声波功率200 W和24 k赫兹(200s模型,Hielscher博士,德国)microtip配备2毫米探头。其超声振动振幅控制器将标称功率的100%。超声波浴360 W(J.P. Selecta,巴塞罗那,西班牙) 也被测试作为一种替代的超声波探头。拔掉进行恒定温度的温度控制器耦合超声波浴。传统提取方法搅拌萃取被用作参考与超声波辅助提取法的方法。所有的实验重复进行。
三种不同的溶剂系统,Me OHMe CN,与几个水百分比(30 - 70%)和两个温度(10-60℃)对大豆异黄酮的提取进行了评估。最初使用提取方法0.5 g的冷冻干燥的大豆萃取溶剂25毫升提取10分钟。这个方法进一步优化了提取工艺。提取后,1毫升的2,5-搅拌萃取二羟基苯甲醛作为内部标准。然后将萃取液离心10 min,过滤,通过0.45毫米的尼龙注射器过滤器(微孔滤膜HN、爱尔兰)进行液相色谱分析;高效液相色谱法(HPLC)
高效液相色谱–紫外分析的提取物在一个水系统由自动进样器进行(717 +),泵控制器(600)、泵(616),和一个光电二极管阵列检测器(996),使用一个RP-18柱(李chrospher 100、5毫米,默克)和梯度的酸化水(0.1%乙酸)(溶剂)和乙腈(0.1%乙酸)(溶剂B)在流速为0.3毫升/分钟的梯度为0 min,10 min,15% B;30% B;20 min,25 min,30% B;100% B;35分钟100%的紫外从200到400 nm吸光度监测。紫外光谱记录,并在254纳米的异黄酮峰面积进行定量。进样体积为10 mL的校准曲线(相关系数)对大豆黄酮、染料木苷、染料木素分别是y=44751x+8805 (r2=0.9980), y=77969x—31141(r2=0.9967) 和 y=79785x—55987 (r 2=0.9952)。
;检出限(μg/g) 染料木苷、染料木素和大豆苷元,分别为1.3、1.6和2.1。检测极限计算使用该软件[18]。每个异黄酮的定量是通过使用相应的响应因子b-glucoside集团和纠正的分子质量的差异。据报道,这个方法检测值最接近正确值。
高效液相色谱–质谱(MS)的提取物的分析中进行Finnigan LCQ质耦合系统的Finnigan垫(美国加利福尼亚州圣何塞热电子,)???该设备配备一个光谱系统2000模型梯度泵(美国热分离产品,弗里蒙特,CA)和质量检测器(模型LCQ),由一个电喷射接口和一个离子阱质量分析器。软件的控制设备,数据的采集和处理是Xcalibur,1.2版。在LCUV应用相同的梯度。进样体积是100毫升。界面条件是:积极的电离模式中,毛细管温度:220℃,喷涂电压:4.6 k V,毛细管电压:5 V,专注气体流量:80(任意单元)和辅助气体流量:10(任意单元)。ESI质谱在200–600 m/z范围内获得。;分析了异黄酮糖甙黄豆苷,黄豆黄苷、精制和丙二酰萃取精制。每个异黄酮的识别是由比较保留时间与纯粹的标准,以及光电二极管阵列检测和MS谱(图1)。异黄酮提取物的色谱分析HPLC-UV图2所示。
;;五、结果与讨论;;大豆异黄酮的提取效率提高了因为使用了超声波,但依赖于所使用的溶剂。几乎所有的病例显示,总用超声波辅助提取法和个人异黄酮是(0 - 15%)高于同搅拌萃取。使用搅拌萃取超声波辅助提取法也显示类似的行为:当使用纯搅拌萃取效率低
ET OH(50%),Me OH(50%)和Me CN(40%)产生的最高收益率的溶剂总异黄酮,他们之间只有微小的差异。黄豆苷的最佳提取溶剂为ET OH(50%),Me OH(50%)他们之间没有区别。黄豆黄苷,最佳提取溶剂为50% ET OH。;为了评估的影响温度对异黄酮糖甙的提取效率表3和表4显示个人的收益率(μg / g)和总异黄酮,在不同的提取方法和提取溶剂的差异
;温度对异黄酮的提取有很大的影响。增加10到60℃的温度显著增加使用超声波辅助提取法和搅拌萃取提取效率
提取时间越长,异黄酮的提取效率越高,20最好 20至30分钟,测试所有异黄酮的提取量略有下降。可能是氧化可能发生20分钟后
收益率(μg/g)和总异黄酮获得,使用50%乙醇,60℃,提取效率基本没有差异,虽然有些差异观察,但两个系统可用于分析规模
评估提取过程的可重复性,一系列的五个样品进行复制。获得的结果(平均(μg / g)±标准差)对黄豆苷(184.27±7.36),黄豆黄苷(66.89±
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