第十九节消化道寄生虫的病原检查.ppt

注意： ①保证粪便新鲜，一般不超过24小时 ②盛粪便的容器须干燥、洁净，无污染； ③容器外贴有标签， ④受检粪量一般为5～10g，或不少于30g， ⑤要严格按照粪检程序进行操作，以免漏检。 1. 直接涂片法　 用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简便，连续作3次涂片，可提高检出率。 （1）蠕虫卵检查：滴一滴生理盐水于洁净的载玻片，用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块，在生理盐水中涂抹均匀；涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下检查，如用高倍镜观察，需加盖片。应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵内含卵细胞或幼虫。 （2）原虫检查 ① 活滋养体检查：涂片应较薄，方法同查蠕虫卵。气温愈接近体温，滋养体的活动愈明显。必要时可用保温台保持温度。 ② 包囊的碘液染色检查：直接涂片方法同上，以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多，可用吸水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查活滋养体，可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液，取少许粪便在碘液中涂匀，再盖上盖片。涂片染色的一半查包囊；末染色的一半查活滋养体。 二、厚涂片透明法（改良加藤法） 取约5mg（已用100目不锈钢筛除去粪渣）粪便，置于载玻片上，覆以浸透甘油－孔雀绿溶液的玻璃纸片，轻压，使粪便铺开（20×25mm）。置于30～36℃温箱中约半小时或25℃约1小时。待粪膜稍干，即可镜检。 玻璃纸准备：将玻璃纸剪成22×30mm大小的小片，浸于甘油－孔雀绿溶液（含纯甘油100ml、水100ml和3％孔雀绿1ml的水溶液）中，至少浸泡24小时，至玻璃纸呈现绿色。 使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。如粪膜厚，透明时间短，虫卵难以发现；如透明时间过长，则虫卵变形，也不易辨认。 定量透明法　 适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数。此法系应用改良聚苯乙烯作定量板，大小为40×30×1.37mm，模孔为一长圆孔，大小为8×4mm，两端呈半圆形，所取的粪样平均为41.7mg。操作时将大小约4×4cm的100目尼龙网或金属筛网覆盖在粪便标本上，自筛网上用刮片刮取粪便，置定量板于载玻片上，用一手的两指压住定量板的两端，将刮片上的粪便填满模孔，刮去多余粪便。掀起定量板，载玻片上留下一个长形粪样，然后在粪条上覆盖含甘油－孔雀绿溶液的大小约为5.0～2.6cm的玻璃纸条，展平后加压，使玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经1～2小时粪便透明后置镜下计数。将所得虫卵数×24，再乘上述粪便性状系数，即为每克粪便虫卵数。 三、浮聚法：利用比重较大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面。常用的方法有两种： （1）饱和盐水浮聚法：此法用以检查钩虫卵效果最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯（高3.5cm，直径约2cm的圆形直筒瓶）中，加入少量饱和盐水调匀，再慢慢加入饱和盐水到液面略高于瓶口，但不溢出为止。此时在杯口覆盖一载玻片，静置15分钟后，将载玻片提起并迅速翻转，镜检 。 * * 第十九节 消化道寄生虫的病原检查 主要是根据 蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片， 原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊，某些节肢动物； 可随粪便排出体外 有些虫体可在肛周产卵， 绦虫孕节主动从肛门逸出过程中被挤破、虫卵可散落在肛周， 所以，采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫 （2）硫酸锌离心浮聚法：此法可用于检查原虫包囊，球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约1g，加10～15倍的水，充分搅碎，按离心沉淀法过滤，反复离心3～4次，至水清为止，最后倒去上液，在沉渣中加入比重1.18的硫酸锌液（33％的溶液），调匀后再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处，离心1分钟。用金属环取表面的粪液置于载玻片上，加碘液一滴，镜检。 （3）蔗糖离心浮聚法：此法适用于检查粪便中隐孢子虫的卵囊。取粪便约5g，加水15～20ml，以260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心5～10分钟，吸弃上清液，加蔗糖溶液（蔗糖500g，蒸馏水320ml，石炭酸6.5ml）再离心，然后如同饱和盐水浮聚法，取其表液膜镜检（高倍或油镜）。卵囊透明无色，囊壁光滑，内有一小暗点和发出淡黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大，常紧贴于盖片之下，但1小时后卵囊脱水变形不易辨认，故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖溶液。 浓聚法 1．沉淀法：原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底，有助于提高检出率。但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。 （1）重力沉淀法：取粪便20～30g、加水成混悬液，经金属筛（40～60孔）或2、3层湿纱布过滤，再加清水冲洗残渣；过滤粪液在容器中静置25分钟，倒去上液，重新加满清水，以后每隔15～20分钟