大鼠5-羟色胺（5-HT）酶联免疫分析（ELISA）.doc

大鼠5-羟色胺(5-HT)酶联免疫盒使用说明书本试剂仅供研究使用(5-HT)的含量。 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定中(5-HT)水平。用纯化的(5-HT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入(5-HT)再与HRP标记的ET-1抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMB在酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的(5-HT)呈正相关。用酶标仪在nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品(5-HT)浓度。 -20℃保存，但应避免反复冻融μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为150 pg/ml，100 pg/ml ，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 p