《微生物学与免疫学》6-微生物的生长和控制-王莹.pptVIP

低温维持法（LTH，low temperature holding method） 高温瞬时法（HTST，high temperature short time） 在63 ℃下保持30 min可进行牛奶消毒 牛奶消毒时只要在72℃下保持15 s即可 巴斯德消毒的两种具体方法 优点：杀灭物料中无芽孢的病原菌（如结核杆菌或沙门氏菌），而又不影响它们的风味。 缺点：不能杀灭芽孢和某些病原体。 例如，伯氏考克斯氏体（Coxiellaburnetii )，是一种立克次氏体，引起Q热的病原体。 ② 煮沸消毒法 100 ℃处理15～30 min 一般用于饮用水的消毒 ③ 间歇灭菌法（fractional sterilization或tyndallization） （1）80～100 ℃下蒸煮15～60 min，杀灭微生物营养体； （2）室温或37 ℃下保温过夜，诱使残存芽孢发芽； （3）重复(1)、(2)步骤3次，达到较低温度下彻底灭菌目的。 例如，培养硫细菌的含硫培养基用间歇灭菌法灭菌，其内所含元素硫在99～100℃的温度下可保持正常结晶形，而常规的加压灭菌（121℃）后会引起硫熔化。 适用于不耐热培养基的灭菌。 （2）加压法 ① 常规加压蒸汽灭菌法 （normal autoclaving） ② 连续加压蒸汽灭菌法 （continuous autoclaving ） ① 常规加压蒸汽灭菌法（normal autoclaving） 一般称作“高压蒸汽灭菌法”。这是一种利用高温（而非压力）进行湿热灭菌的方法。 高压蒸汽灭菌法的原理： 将待灭菌的物件放置在盛有适量水的专用加压蒸汽灭菌锅（或家用压力锅）内，盖上锅盖，并打开排气阀，通过加热煮沸，让蒸汽驱尽锅内原有的空气，然后关闭锅盖上的排气阀阀门，再继续加热，使锅内蒸汽压逐渐上升，随之温度也相应上升到100℃以上。 （1）121℃（压力为1 kg／cm2或15磅／英寸2），15～20min； （2）115℃（0.7 kg／cm2或10磅／英寸2），30min。 适合于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵工厂中对培养基、物料及多种器材的灭菌 。 优点：操作简便，效果可靠，广泛使用。 缺点：破坏一些不耐热的营养成分。 ② 连续加压蒸汽灭菌法 （continuous autoclaving ） 在发酵行业里也称“连消法”。 将培养基在发酵罐外连续不断地进行加热、维持和冷却，然后才进入无菌的发酵罐。 （1）135～140℃，5～15 s，工业上发酵培养基 （2）135～150℃，2～6 s，牛奶或其他液态食品 （超高温灭菌） 只在大规模发酵工厂中作培养基灭菌用 影响加压蒸汽灭菌效果的因素 1.杀菌物体含菌量 2.灭菌锅内空气排除程度 3.灭菌对象的pH 4.灭菌对象的体积 5.加热与散热速度 二、辐射作用 用于灭菌的电磁波有微波，紫外线(UV)、X-射线和γ-射线等 三、过滤除菌 对空气和培养液中某些不耐热的成分可采用过滤除菌法“灭菌”。 棉花、玻璃纤维或石棉 微孔滤膜0.22～0.45 ?m 醋酸纤维素、 硝酸纤维素 核孔滤器 优点：操作方法简便，不破环物质结构。 缺点：无法滤除液体中的病毒和噬菌体。 过滤除菌的装置 （四）高渗、干燥、超声波等 化学消毒灭菌法 生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物。 超净工作台是在特定空间内，室内空气经预过滤器初滤，由小型离心风机压入静压箱，再经空气高效过滤器二级过滤，从空气高效过滤器出风面吹出的洁净气流具有一定的和均匀的断面风速，可以排除工作区原来的空气，将尘埃颗粒和生物颗粒带走，以形成无菌的高洁净的工作环境。 超净工作台 生物安全柜 生物安全柜 生物安全柜 本章重点 掌握：消毒、灭菌、防腐、无菌的概念； 干热灭菌法、湿热灭菌法（巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法）。 了解：影响湿热灭菌的因素，常用消毒剂的种类和应用，生物安全的概念。 下节课再见了…… 微生物的生长与控制 王莹 微生物教研室ywang@cpu.edu.cn 第一节 微生物的生长 生长：细胞体积的增大； 繁殖：细胞数量的增加 单细胞微生物 生长与繁殖难以区分，以群体数目的增加作为生长的标志。 多细胞丝状微生物 细胞物质量的增加作为生长的标志，通过形成孢子（有性与无性）使得个体数目的增加叫作繁殖 固体培养 菌落colony：在固体培养基上,由单个细胞繁殖形成的肉眼可见的子