非晶状体 -晶状体蛋白及三叶因子蛋白复合物的细胞核转运及其选择性杀伤肿瘤细胞机制的研究.pdfVIP

动 物 学 研 究 2008，Aug. 29(4) ：386-398 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research doi:10.3724/SP.J.1141.2008.04386 非晶状体βγ-晶状体蛋白与三叶因子蛋白复合物的细胞核 转运及其选择性杀伤肿瘤细胞机制的研究 何英英1,2,# 1,2,# 1,2,3 1 1,* ，刘树柏 ，钱金桥 ，李文辉 ，张 云 (1. 中国科学院昆明动物研究所 动物模型与人类疾病机理重点实验室，云南 昆明 650223；2. 中国科学院研究生院，北京 100049； 3. 昆明医学院第一附属医院 麻醉科，云南 昆明 650032) 摘要：非晶状体βγ晶状体蛋白与三叶因子蛋白复合物(βγ-CAT)是从大蹼铃蟾（Bombina maxima ）皮肤分泌物 中分离的分子量为72 kDa 的天然蛋白复合物。本研究通过激光共聚焦显微镜和Western blot分析βγ-CAT在人脐静脉 内皮细胞(HUVEC) 中的细胞核转运机制，以及βγ-CAT对多株肿瘤细胞(HCT116，HT29 ，A375 ，Hela ，THP-1等) 的细胞毒效应。结果表明：βγ-CAT的α亚基中含有典型的GTP/ATPase 的保守结构模体Walker A和Walker B ，体外 检测到βγ-CAT具有GTP/ATP水解酶和GTP/ATP结合活性。在细胞核转运过程中，βγ-CAT 的α亚基和β亚基参与形 成约150kDa含有泛素化修饰信号的大分子复合物，且泛素化修饰信号和βγ-CAT 的α亚基和β亚基共定位于细胞内 和融合于细胞核区域的转运囊泡小体中。βγ-CAT能够选择性的杀伤肿瘤细胞，诱导肿瘤细胞脱落和发生凋亡。上 述结果为进一步深入研究βγ-CAT的细胞核转运和调节细胞功能的分子作用机制提供思路和线索。 关键词：非晶状体βγ- 晶状体蛋白；三叶因子；非晶状体βγ- 晶状体蛋白和三叶因子蛋白复合物；GTP/ATP 水 解酶；肿瘤细胞脱落与凋亡；泛素化修饰；细胞核定位 中图分类号：Q959.5 ；Q51 文献标识码：A 文章编号：0254-5853-(2008)04-386-013 Mechanism of βγ-CAT Cell Nuclear Transportation and Selectively Killing of Tumor cells 1,2,# 1,2,# 1,2,3 1 1,* HE Ying-ying ，LIU Shu-bai ，QIAN Jin-qiao ，LEE Wen-hui ，ZHANG Yun (1. Biotoxin Units ，Key Laboratory of Animal Models and Human Disease Mechanisms ，Kunming Institute of Zoology ，the Chinese Academy of Sciences ，Kunming Yunnan 650223，China；2. Graduate School of the Chinese Academy of Sciences，Beijing 1000