集胞藻PCC6803中ORF sll0260对于维持基本生命活动的必要作用.pdfVIP

Vol. 33. No. 5 第 33 卷第5 期 水~生物学报 2009 年 9 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA Sep. , 2009 DOI 号:10. 3724/SP. J.OOOO. 2009. 50789 集胞藻 PCC6803 中 ORF sl10260 对于维持基本生命活动的必要作用 罗泉t ， 2 徐旭东1 (1.中阙科学院水生生物研究所，淡水生态与生物技术阁家黛点实验室，斌汉 430072; 2. 中因科学院研究生院，北京 1仰049) 摘要:集胞藻(8阳C加cystis sp. )6803 的未知功能基因中有很多是细胞的基本生命活动所需要的，这些基间插入失 活往往会导致细胞死亡，因而得不到分离完全的突变株，难以进行遗传学研究。构建突变株以铜离子调控的启动 子 P..E 来控制此类未知功能基囚的表达则可能获得宠全分离。构建 P，..，E-slI0260 突变株并对 sll0260 必要作用进行 研究。在完全分离的突变株中，去除铜离子可关闭 sll0260 的表达。此时，突变株生长受到严重抑制，色素食最大为 降低，类囊体膜结构破坏，光合作用消失，呼吸能力下降。这蝶结果表明该基因对于维持集胞藻 6803 的慕本生命 活动来说是必需的。亚细胞)Î!位研究显示 sll0260 编码一个膜蛋白，优于质膜和外膜混合物中。 8110260 可能作为 某些离子的转运蛋白起作用，或者lï接与类集体膜的发生过程相关。 关键词:集胞藻 6803 ;sl10260 ;P,E ; 膜蛋白 中图分类号:Q344φ. t 文献标识码:A 文章编号: 1000-3207(2009) 05 -0789-06 构严重受橱，表明该基因对于维持集胞穰 6803 藏本 蓝藻又称蓝细菌，是一类能够进行植物型产氧 光合作用的原核生物，被认为是高等植物和真核藻 生命描动来说是必需的。 类叶操体的祖先。与一般革兰氏阴性菌所不阔的 1 材料与方法 是，蓝穰细胞内具有高度分化的内膜系统，类囊体 1.1 麓株、培养和转化 集胞蝶 6803 由荣国嘴歇 膜，它是细胞能f宣传导的重要场所。集胞草草(Sy旧 chocystis sp. ) PCC6803 (以下简称集胞藻 6803 ) 根州立大学巳故教授 Mclntosh L 提供，在械体 BGll 2 培养基中，(30 士 2) c、30μE/m • s 光照的条件下 类单细胞非固氮蓝穰，生活在被水中，既可以自养生 长，也可以利用葡甜糖异养生长。它具有天然的 静置培养。在用飞lE启动子来调控基附表达的实瞌 DNA 转化系统，企蜂因组序列于 1996 年公布[ll ，是 中，所有榕掖均用 18.2 mfl • cm 的去离子水(Mi lJi- 辑因工程和光合作用分子生物学研究中的重要模 pore) 配制，并根据需要配制含有或缺乏铜离子的 式。在其 3264 个开放阅读摧中(ORF) [幻，有 2185