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专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具(测)
(满分60分,40分钟完成)
1.图1为某种质粒简图,图2表示某外源DNA上的目的基因,小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、Hind Ⅲ的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )
A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割,则可选EcoRⅠB. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后,再用DNA连接酶连接,形成一个含有目的基因的重组DNA,此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,酶切时可使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理D. 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后,含有2个游离的磷酸基团【答案】B
2.某环状DNA分子共含2000个碱基,其中腺嘌呤占30%,用限制性核酸内切酶BamHI(识别序列为)完全切割该DNA分子后产生2个片段,则下列有关叙述中,正确的是( )
A.一个该DNA分子连续复制2次,共需游离的胞嘧啶脱氧核苷酸1600个
B.含BamH I的溶液中加入双缩脲试剂A震荡后即出现紫色
C.一个该DNA分子含有2个BamHI的识别序列
D.一个该DNA分子经BamHI完全切割后产生的核酸片段,共含有8个游离的磷酸基团
【答案】C
【解析】DNA分子共含2000个碱基,其中腺嘌呤占30%,则胞嘧啶=2000×(1-30%×2)/2=400个,则一个DNA分子复制两次得到4个DNA分子,所以需要游离的胞嘧啶脱氧核苷酸400×3=1200个,A错误;BamHI的溶液中含有酶,化学本质是蛋白质,加入双缩脲试剂A无色,再加3-4滴双缩脲试剂B成紫色,B错误;环状DNA分子被切成两个DNA分子片段说明,含有2个BamHI的识别序列,C正确;两个DNA分子片段4个磷酸二酯键断裂,共有4个磷酸基团,D错误。
3.如图为细胞内某基因(15N标记)局部结构示意图,A占全部碱基的20%,下列说法错误的是( )
A.维持该基因结构稳定的主要化学键有磷酸二酯键和氢键
B.在无变异条件下,该基因的碱基的比值为
C.限制性核酸内切酶作用①部位,DNA解旋酶作用于②部位
D.将该基因置于15N培养液中复制3次后,含15N的脱氧核苷酸链占
【答案】D
4.与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是:( )
A.反转录酶 B.RNA聚合酶 C.DNA连接酶 D.解旋酶
【答案】C
【解析】反转录酶能催化反转录过程,但其作用部位不是磷酸二酯键,A错误;RNA聚合酶的作用是催化转录形成RNA,能形成RNA上的磷酸二酯键,而限制酶是作用于DNA上的磷酸二酯键,故两者不完全相同,B错误;DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键,作用于与限制性核酸内切酶相对的部位,C正确;DNA解旋酶能解开双链DNA,破坏的是碱基对之间的氢键,D错误。
5.已知正常的β-珠蛋白基因(以βA表示)经MstⅡ限制性核酸内切酶切割后可得到长度为1.15 kb和0.2 kb的两个片段(其中0.2 kb的片段通常无法检测到),异常的β珠蛋白基因(以βS表示)由于突变恰好在MstⅡ限制性核酸内切酶切割点上,因而失去了该酶切位点,经MstⅡ限制性核酸内切酶处理后只能形成一个1.35 kb的DNA片段,如图1;现用MstⅡ限制性核酸内切酶对编号为1、2、3的三份样品进行处理,并进行DNA电泳(电泳时分子量越小扩散越快),结果如图2,则1、2、3号样品所对应个体的基因型分别是(以βA、βS表示相关的基因)( )
A.βSβS、βAβS、βAβA
B.βAβA、βAβS、βSβS
C.βAβS、βSβS、βAβA
D.βAβS、βAβA、βSβS
【答案】A
6.下列属于基因工程工具酶的是( )
①限制性核酸内切酶 ②DNA水解酶
③DNA聚合酶 ④DNA连接酶 ⑤RNA聚合酶 ⑥解旋酶
A.①④ B.①②③ C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑤⑥
【答案】【解析】 B.
C. D.
【答案】D
【解析】DNA用Kpnl单独酶切会得到600by和200by两种长度的DNA分子,与题意不符,A错误;DNA用EcoRI单独酶切会得到800by和200by两种长度的DNA分子,与题意不符,B错误;DNA用EcoR1酶切后得到200by和800by两种长度的DNA分子,与题意不符,C错误;DNA用EcoR1酶切后得到的DNA分子是1000by,用Kpn1单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子,用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子,与题意相符,
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