实验7胃肠运动的直接观察以及小肠平滑肌收缩记录.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 实验七 胃肠运动的直接观察 离体肠段平滑肌运动的描记 目的： 1. 动物在体胃肠运动及调节 2.了解肠段平滑肌的生理特性 3. 学习离体肠段平滑肌运动描记的实验方法 原理: 　胃肠道平滑肌经常维持一定的紧张性收缩，在体内受到神经和体液的调节。在神经及某些药物的作用下，这种紧张性及运动节律可发生改变。神经调节中，副交感神经通过释放乙酰胆碱使其运动加强，交感神经通过释放去甲肾上腺素使其运动减弱。 原理: 胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量或低浓度的乙酰胆碱能激动M受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道平滑肌。阿托品与胆碱受体结合阻断胆碱能递质从而产生抗胆碱作用。新思的明作为胆碱酯酶的抑制剂，抑制乙酰胆碱的分解，使乙酰胆碱的作用持续加强。 原理： 　 　　消化道平滑肌的特点是兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性，自动节律性，对化学物质，温度和机械牵张刺激较敏感等特点，给予离体肠肌一接近于在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本实验观察当模拟内环境发生变化时，离体小肠平滑肌运动的变化。 消化道平滑肌一般特性： 兴奋性低，收缩缓慢（静息电位变化大，-50至-60 mv ，由大量K+外流、少量Na+ 和Cl-内流形成 ）， 自动节律性（BER，节律自动去极化、复极化的缓慢慢波电位；一旦去极化达到阈电位-40 mv，大量Ca2+和少量Na+快速内流即产生动作电位） 伸展性 紧张性 对化学、温度和机械牵张刺激的敏感性 慢波电位（基本电节律） 频率：胃3次／min ；十二指肠12次／min；回肠末　　　端8－9次／min 波幅：10－15mV 产生机制：可能与细胞膜上生电性钠泵的活动有关。 动作电位 特点：锋电位上升慢、时程较长（10－20ms）、幅值较低。 产生机制：主要是Ca2+内流 原理： 　　　该实验方法不仅在理论上证明平滑肌的生理特性，而且还可用来测量化学物质或药物的生理学特性，被称为生物学鉴定法。 材料与设备： 家兔，手术台，手术器械，麦氏浴槽，恒温水浴，RM6240，张力换能器，氧气袋，铁架台，烧杯，酒精灯，滴管，注射器，台氏液，阿托品（0.5mg/ml），新思的明（1mg/ml） 0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱，1mol/L NaOH，1mol/L HCl 方法与步骤： 一.胃肠运动观察： 　1.手术操作： （1）家兔称重，麻醉 （2）将兔子仰卧位固定于手术台上 （3）剪腹部毛，沿腹中线切口，剖开腹腔，暴露胃肠。 方法与步骤： 　2.实验项目： （1）观察正常情况下胃和小肠的运动。注意其紧张度（可用手触摸胃测其紧张度）。 （2）由耳缘静脉静脉注射新思的明0.25ml，或滴几滴于胃肠浆膜上，观察胃和小肠运动的变化。 （3）在新思的明作用的基础上，注射阿托品0.25ml，观察胃和小肠运动的变化。 方法与步骤： 二.离体小肠平滑肌的生理特性： 　1.实验准备：装备麦氏浴槽，将其放置于37℃恒温水浴。麦氏浴槽内盛满37℃台氏液，将充满氧气的球胆经橡皮管连接至麦氏浴槽乙型通气管上，不断注入氧气，调节气流速度，使气泡一个接一个注入。 RM6240 方法与步骤： 　2. 在幽门下端分离十二指肠3-4cm，双结扎此肠段，于双结扎中间将肠段剪断，用台氏液反复冲洗肠内容物，在其两端穿线，将一端固定于麦氏浴槽乙型通气管挂钩上，另一端与张力换能器相连。 　3.待此装置稳定10-20分钟后，使用RM6240记录小肠段平滑肌运动曲线。 方法与步骤： 4.实验项目： （1）观察记录37 ℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。 （2）观察记录25 ℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。 方法与步骤： （3）待台氏液温度稳定在37 ℃后，用滴管向浴槽中加入0.01%乙酰胆碱3-4滴，观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。 （4）待平滑肌稳定后，加入0.01%肾上腺素3-4滴，观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。 方法与步骤： （5）滴加1mol/L HCl溶液3-4滴，观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。 （6）滴加1mol/L NaOH溶液3-4滴，观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。 注意事项： 1.实验操作过程中，注意动物保温。经常用温热的生理盐水湿润胃肠。 2.取小肠标本时勿牵拉；标本安装好后应在台氏液里稳定5-10分钟，待标本有收缩活动时即可开始实验。 3.保证氧气的补充