Bacillaene酮还原酶结构域的异源表达及底物特异性分析.PDFVIP

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Bacillaene酮还原酶结构域的异源表达及底物特异性分析

生 物 工 程 学 报 孙潇慧 等/Bacillaene 酮还原酶结构域的异源表达及底物特异性分析 1355 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn September 25, 2015, 31(9): 1355−1362 DOI: 10.13345/j.cjb.140580 ©2015 Chin J Biotech, All rights reserved 工业生物技术 Bacillaene 1,2* 1* 2 2 1 孙潇慧 ,车程川 ,季俊杰 ,郑舰艇 ,杨革 1 273165 2 100190 , , , . Bacillaene . , 2015, 31(9): 1355–1362. Sun XH, Che CC, Ji JJ, et al. Heterologous expression and substrate specificity of ketoreductase domain in Bacillaene polyketide synthase. Chin J Biotech, 2015, 31(9): 1355–1362. 摘 要: Bacillaene 生物合成过程中,聚酮合酶第一个延伸模块的酮还原酶结构域 (BacKR1) 既催化α酮基的 还原,也催化 β酮基的还原,具有天然的底物宽泛性。为进一步研究该结构域的底物特异性,在大肠杆菌中对 其进行了异源表达。体外酶学分析表明 BacKR1 可以催化聚酮类底物 (±)-2- 甲基-3-氧代戊酸- 乙酰半胱胺硫酯 外消旋体的立体选择性还原,仅生成4 种非对映异构体中的一种,此外BacKR1 还可以催化环己酮和对氯苯乙 酮等非聚酮类底物的还原,暗示了聚酮合酶中酮还原酶结构域作为生物催化剂的潜力。 : 聚酮,酮还原酶,异源表达,立体选择性,底物特异性 Received: November 24, 2014; Accepted: April 28, 2015 Supported by: National Basic Research Program of China (973 Program) (No. 2013CB734000), National Natural Science Foundation of China (Nos. , Beijing Municipal Natural Science Foundation (No. 5144031), the Recruitment Program of Global Youth Experts and Initial Funds of Chinese Academy of Sciences. Corresponding authors: Ge Yang. Tel: +86-537-4456179, E-mail: yangge100@126.com Jianting Zheng. Tel: +86-10 E-mail: jtzheng@ *These authors contributed equally to this study. (973 ) (No. 2013CB734000) (Nos.31400051) (No. 5144031) 2015-06-08 /kcms/detail/11.1998.Q1510.007.html 1356 ISSN 1000-3061 CN 11-1998/Q C

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