2016现代组织化学技术-免疫组织化学技术-硕研精选.pptx

现代组织化学技术 华中科技大学同济医学院 解剖学系组织胚胎学教研室 李宏莲 ;1. 什么是免疫组织化学技术？;ABC法显示胰岛B细胞;2. 免疫组织化学技术的基本原理;2. 免疫组织化学技术的基本原理;2. 免疫组织化学技术的基本原理;抗体经酶水解后的产物;抗体的种类;抗体的选择，稀释及保存;2. 免疫组织化学技术的基本原理;2. 免疫组织化学技术的基本原理;4. 免疫组织化学技术的分类;（2）根据标记物是否与特异性第一抗体结合 直接法：将特异性第一抗体用标记物标记，直接与标本中的相应抗原结合；特异性强、灵敏度差 *** 拟检抗原种类繁多，将标记物直接标记在其特异性抗体上成本高，商品化可能性低 间接法：对第二抗体进行标记，其中第一抗体可特异性结合组织或细胞中的待检抗原，第二抗体与第一抗体的Fc段结合 *** 优点：信息放大、提高反应的敏感性；只要有一种动物的标记第二抗体，便可用于该种动物的所有特异性第一抗体------间接法较直接法更为实用;（1）取材： 准确、迅速、大小合适、离体固定 （2）固定： 固定剂多选用醛类（4%多聚甲醛?0.01mol/LPBS常用，pH7.4）；固定方法根据情况选定，多用灌流固定法 （3）包埋及切片： 常用石蜡包埋切片和低温冷冻包埋切片，无论哪种切片方法，都要求薄而平整，尽量避免因折叠或划痕造成的非特异性着色 （4）粘片、烤片及防脱