小鼠内耳3种溶酶体酶的定位和酶缺乏时的听力损害.PDF

中南大学学报（医学版） 2006 ，31（1 ） J Cent South Univ （Med Sci ） 79 * 小鼠内耳3 种溶酶体酶的定位及酶缺乏时的听力损害 * 郭运凯 ，谢鼎华，杨新明 （中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉-头颈外科，长沙4 10011） ［摘要］ 目的：研究溶酶体神经氨酸酶（neuraminidase ，Neu1 ）、保护蛋白/ 组织蛋白酶A（protective protein/ ca- thepsin A ，PPCA ）和 -半乳糖苷酶（-galactosidase ， -gal ）在小鼠内耳的分布及相互影响，观察各自酶缺乏时的听 β β β 功能改变。方法：分别使用出生后2 个月的野生型（Neu1 + / + ，PPCA + / + 和 -gal + / + ）小鼠各6 只，年龄配对的酶基 β 因缺乏（Neu1 - / - ，PPCA - / - 和 -gal - / - ）小鼠作对照，每组6 只。用听性脑干反应（ABR ）测试短声（click ）、短音8 ， β 16 和32 kHz 听阈，经活体心脏灌注固定、听泡石蜡包埋和耳蜗连续切片，用免疫组织化学方法确定上述3 种酶在 内耳的分布情况。结果： Neu1，PPCA 和 -gal 在内耳不同部位的分布相类似。Neu1 最强的染色主要在螺旋神经节 β 细胞、螺旋韧带、螺旋缘、前庭神经节细胞及壶腹嵴、球囊和椭园囊感觉毛细胞，较弱的染色分布于血管纹和Corti 器内、外毛细胞及支持细胞；PPCA 和β-gal 在螺旋神经节和前庭神经节细胞有较强的染色，血管纹、螺旋韧带、螺旋 缘和Corti 器内、外毛细胞及支持细胞呈较弱的染色反应；各自酶缺乏时内耳免疫染色消失。Neu1 - / - 小鼠内耳PP- CA 和 -gal ，以及 -gal - / - 小鼠Neu1 和PPCA 免疫反应各自无明显改变，而PPCA - / - 小鼠Neu1 染色反应消失，- β β β gal 仅存极弱的染色反应。Neu1 - / - ，PPCA - / - 和 -gal - / - 小鼠听阈分别较其野生型提高约60 ～ 69 dB ，40 ～ 48 dB 和 β 7 ～ 10 dB 。结论：Neu1，PPCA 及 -gal 分布于内耳不同组织和细胞，3 种酶也以1 种多酶复合物的形式存在于内耳； β 各自酶基因缺乏可致不同程度的听力损害。 ［关键词］ 溶酶体酶； 神经氨酸酶； 保护蛋白/ 组织蛋白酶A ； β-半乳糖苷酶； 内耳； 聋； 小鼠 ［中图分类号］ R764 . 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 167