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固定化酶、固定化细胞
【考纲要求】
1、制备和应用固定化酶(A)2、酵母细胞的固定化(B)催化效率高,低耗能、低污染等既能与反应物接触,又能与产物分离成本低,操作更容易
1.判断下列说法的正误
(1)固定化酶适合采用包埋法,因为酶分子较小( )
(2)固定化细胞相当于固定了一系列酶( )
(3)生产高果糖浆时所固定的葡萄糖异构酶可以无休止重复使用下去( )
(4)用固定化细胞进行酒精发酵时,不受温度的影响( )
2.如图表示几种固定酶或细胞的方法,请问哪些适合固定酶?哪些适合固定细胞?
3.对于固定化酶和固定化细胞,从操作角度考虑,哪种更容易?哪种方法对酶活性的影响更小?如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法?如果反应物是大分子物质,又应该采用哪种方法?
【例1】(2015.海口模拟)某校学生尝试用琼脂作载体,用包埋法固定α-淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。实验结果见表(假设加入试管中的固定化淀粉酶量与普通α-淀粉酶量相同)。实验表明1号试管中淀粉未被水解,你认为最可能的原因是( )
比较项目 1号试管 2号试管 固定化淀粉酶 √ 普通α-淀粉酶 √ 淀粉溶液 √ √ 60 ℃保温5分钟,取出冷却至室温,滴加碘液 现象 变蓝 不变蓝 A.实验中的温度过高,导致固定化淀粉酶失去活性
B.淀粉是大分子物质,难以通过琼脂与淀粉酶接触
C.水浴保温时间过短,固定化淀粉酶未将淀粉水解
D.实验程序出现错误,试管中应先加入碘液后保温
【例2】(2013江苏卷)下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是( )
A. 可用包埋法制备固定化酵母细胞
B. 反应产物对固定化酶的活性没有影响
C. 葡萄糖异构酶固定前后专一性不同
D. 固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应
【例3】下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是( )
A.固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显
B.固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧
C.利用固定化酶降解水体中的有机磷农药,需提供适宜的营养条件
D.利用固定化酵母菌细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物
【训练1】下列有关固定化酶技术和固定化细胞技术的说法不正确的是( )
A.固定化酶和固定化细胞的技术方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法
B.因为酶分子比较大,所以固定化酶技术更适合采用包埋法
C.与固定化酶技术相比,固定化细胞制备的成本低,操作更容易
D.反应物如果是大分子物质应采用固定化酶技术
【训练2】固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶,以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率,包括酶活性和酶的数量。图甲、乙、丙为部分研究结果。下列有关叙述中,错误的是( )
A.由甲图可知,固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强
B.由乙图可知,浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好
C.由丙图可知,固定化酯酶一般可重复使用3次,之后若继续使用则酶活力明显下降
D.固定化酶的酶活力较高,主要原因是增加了酶与底物的接触面积
【训练3】下列关于固定化酶技术说法中,正确的是( )
A.固定化酶技术就是固定反应物,让酶围绕反应物旋转的技术
B.固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应
C.固定化酶中的酶无法重复利用
D.固定化酶是将酶固定在一定空间的技术
二、固定化酵母细胞
(1) 酵母细胞的活化:活化就是处于 状态的微生物重新恢复正常的生活状态。需要的活化时间较短,活化时体积会变大,应选择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。
(2) CaCl2溶液的作用:CaCl2溶液的作用是使海藻酸钠胶体发生聚沉,形成 。
(3)海藻酸钠溶液的浓度:(实验的关键)对海藻酸钠溶化时要 ,防止焦糊。
浓度过高,将很难形成凝胶珠。
浓度过低,形成的凝胶珠颜色 并所包埋的酵母细胞的数量
(4)海藻酸钠溶液与酵母菌混合:将海藻酸钠溶液 ,加入已活化的酵母细胞,进行充分搅拌,使其混合均匀,在转移至注射器中。
(5)固定化酵母细胞:以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液 到刚配制好的CaCl2溶
液中,并浸泡 (时间)左右。
3.用固定化酵母细胞发酵
(1)将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用 冲洗2-3次。
(2)将10%葡萄糖溶液转移至锥形瓶中,加入固定好的酵母细胞,置于25℃下发酵24h。
【诊断与思考】
(1)在酵母菌细胞的活化或配制CaCl2溶液时,不能使用自来水( )
(2)配制海藻酸钠溶液时用小
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