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- 2017-06-05 发布于湖北
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动物细胞工程 动物细胞的培养过程 思考讨论:在动物细胞培养过程中, 为什么要用胰蛋白酶对取出的动物 组织进行处理? 有关概念: 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。 有关概念 植物组织培养和动物细胞培养的比较 思考下列问题: 1、什么叫动物细胞融合?植物体杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢? 2、动物细胞在结构上有何区别?这与它们杂交或融合过程有什么影响? 3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同?两者的融合过程是否也一样? 动物细胞融合 细胞融合与融合诱导细胞融合物质: 二、单克隆抗体 B淋巴细胞与抗体的关系: 单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体? 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 * 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 动物细胞工程常用技术 3、动物细胞培养过程: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 (分解弹性纤维) 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 胰蛋白酶处理动物组织,可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解,获得单个细胞。 细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。 3.动物细胞培养的条件: 1.无菌无毒的环境 2.营养 3.温度和pH 4.气体环境 4.动物细胞培养技术的应用: 1.蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2.健康细胞培养 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 3.细胞的生理、药理、病理研究 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 获得细胞或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株 培养目的 葡萄糖 动物血清 蔗糖 植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 细胞的全能性 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 思考: 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料? 1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处? 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞? 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有:1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强 成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 核移植技术 1.克隆羊培育过程 黑面绵羊去核卵细胞 白面绵羊乳腺细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 2.体细胞核移植技术的应用前景 3.体细胞核移植技术存在的问题 一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 诱导剂:仙台
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