第十二篇RNA的生物合成（转录）.doc

第十章RNA的生物合成（转录） 教学基本要求 解释转录的概念及特点。 简要叙述原核生物RNA聚合酶的组成和功能、真核生物RNA聚合酶的功能。 扼要叙述RNA转录过程。 写出几种RNA转录后加工过程。 解释核酶（ribozyme）概念。 教材内容精要（一）RNA生物合成的概念 与DNA合成相同，RNA的合成有以DNA和RNA为模板两种方式。以双链DNA分子中的一条链作为模板，在DNA指导的RNA聚合酶催化下进行的RNA合成，通常称转录。因转录是以DNA中的一条链为模板因此RNA转录是不对称的。DNA的遗传信息以碱基互补配对原则转录至RNA分子中。以RNA为模板合成RNA的过程又称RNA的复制。转录作用广泛存在于生物界，RNA复制见于一些病毒基因组的复制过程。人们发现有催化活性的RNA称为核酶。 （二）转录体系的组成 RNA转录体系的组成包括：DNA模板、四种三磷酸核苷（NTP）、RNA聚合酶、某些蛋白因子及无机离子，合成方向自5′3′,RNA产物的序列与DNA模板链的序列相互补。这里重点介绍DNA模板和RNA聚合酶。 DNA模板：DNA双链中作为RNA转录模板的那一条链称为模板链；另一条链不被转录称作编码链。不同的基因分别分布在DNA分子上两条互补的单链中，各个基因的模板链并不全在同一条链上。 在DNA模板链进行转录的特殊部位称转录起始点，转录从DNA分子起始点开始顺转录方向的区域称为下游（down stream）；从起始点逆转录方向的区域称为上游（up stream)RNA聚合酶识别并结合的部位称作启动子，启动子位于起始点的上游。在转录的DNA模板上还有停止转录的部位，称终止信号。 RNA聚合酶RNA聚合酶（RNA pol）全称为DNA指导的RNA聚合酶。原核生物RNApol高度保守，其组成和功能都很相似。Eoli的RNA全酶由五个亚基组成，即α2ββ′σ。全酶去除σ亚基后（又称σ因子）称为核心酶。σ因子辨认DNA模板上的启动子，协助转录的起动。缺少σ因子的核心酶不能起动转录，核心酶仅能延长RNA链。在真核细胞中已发现四种RNA pol，即RNA pol I、IIⅢ，它们催化不同种类RNA的聚合反应。它们在细胞内的定位及性质不尽相同。真核RNA pol也是由多种亚基组成。（三）转录过程 RNA转录过程可分为三个阶段：起始、延长和终止。E coli转录过程如下。 (1)起始：先由σ因子辨认DNA的启动子部位，并使RNA全酶与启动子结合，在此DNA双链分子局部发生构象变化和结构松散，RNA pol与DNA结合部位暂时打开约17个碱基对长度，展示DNA模板链，以利于RNA pol进人转录泡，催化RNA链的合成。根据DNA模板链上核苷酸的序列，以四种三磷酸核苷为原料（NIP），按碱基互补原则依次与模板链上的相应碱基配对（A-T，U-A，G-C)。在RNA pol的催化下，起始点处相邻的前两个NTP以3′，5′ 磷酸二酯键相连，其中第一个核苷酸多为嘌呤核苷酸A或G，并以G居多。σ因子从模板及RNA pol上脱落，并可再次与核心酶结合而循环使用。 延长：核心酶向模板链下游滑动，与DNA模板链相互补的NTP逐一进入反应体系，在RNA pol的催化下，与前一个核苷酸以磷酸二酯键相连，合成方向5′3′。如此，RNA链逐渐延长。在延长过程中，由打开的DNA双链RNA pol及新合成的RNA局部形成了转录泡（transcription bubble)，转录泡贯穿于延长过程的始终。 终止：当核心酶移动到DNA模板的转录终止部位时，转录终止。转录终止的机理有两种机制。一是在原核细胞中有一种ρ因子，它可识别并结合转录终止信号，使核心酶停止移动，导致RNA聚合反应停止；二是转录终止部位有特殊的碱基序列，即一段GC富集区、随后是一段AT富集区。在GC富集区内组成一段反向重复序列，转录至此生成的RNA在相应序列中形成了发卡结构，使RNA pol脱离模板而终止转录。（四）转录后加工过程 转录后生成的是RNA前体，即未成熟RNARNA前体不具有生物学活性，还需要在酶的作用下加工后才能成为有活性的成熟的RNA。RNA加工部位主要在细胞核内及少数在胞浆中进行。各种RNA的加工过程有自己的特点，但加工的类型主要有以下几种：①剪切和剪接：前者是指剪去部分序列。剪接是指剪切后又将某些片段连接起来。②末端添加核苷酸：如RNA的3′末端添加一CCA③化学修饰：主要发生在碱基和核糖分子上，如tRNA分子中尿苷化学修饰为假尿苷。④RNA编辑：某些RNA，特别是mRNA转录后还需插入、删除和取代某些核苷酸残基，才具有翻译功能，并改变了原有DNA模板上的遗传信息。 mRNA前体的加工：原核生物转录生成的mRNA属于多顺反子mRNA即由操纵子控制生成的一条mRNA可编码几种不同的蛋白质。