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- 2017-06-09 发布于湖北
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植物染色体原位杂交
原位杂交[In situ hybridization,简称ISH],也称作杂交组织化学或细胞学的杂交,是一种能够从形态学上证明特异性的DNA或RNA序列存在于个别细胞、组织部分,单细胞或染色体中的技术,是分子生物学和组织化学、细胞学结合的产物。 原位杂交技术是从Southern和Northern杂交技术衍生而来,包括染色体原位杂交和RNA原位杂交,其基本原理是:含有互补顺序的标记DNA或RNA片段,即探针,在适宜的条件下与细胞内的DNA或RNA形成稳定的杂交体。 原位杂交技术主要方法 一、荧光原位杂交 二、基因组原位杂交 三、原位PCR 四、引物原位杂交技术 五、原位杂交结合显带标记技术 六、原位杂交结合免疫组织化学的双标记技术 七、电镜原位杂交技术 八、整体荧光原位杂交技术 九、DNA纤维荧光原位杂交 fiber-FISH 一、荧光原位杂交 (Fluorescence in situ Hybridization) 是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性;通过显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶核酸进行分析。 DNA荧光标记探针是其中最常用的一类核酸探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的DNA进行染色体及基因水平的分析。 二、基因组
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