研究生有关物质讲座.ppt

有关物质研究 第一节 药物的杂质及其来源 一、药物的纯度 指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。 二、药物中杂质的来源 1. 生产过程中引入 药物中的杂质按来源分为 维生素Ｅ的酸度 取乙醇与乙醚各15ml，置锥形瓶中，加酚酞指示液0.5ml ，滴加 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至微显粉红色，加本品1.0g，溶解后，用氢氧化钠滴定液 (0.1mol/L)滴定，不得过0.5ml 。 葡萄糖注射液 5-羟甲基糠醛 精密量取本品适量（约相当于葡萄糖1.0g），置 100ml量瓶中，加 水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录Ⅳ A），在284nm 的波长处测定，吸收度不 得大于0.32。(吸收系数320） 硫酸阿托品的莨菪碱 取本品，按干燥品计算，加水制成每1ml 中含50mg的溶液,依法测定（附录 Ⅵ E），旋光度不得过－0.40°。 肝素钠钾盐 取本品0.10g ，置100ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试 品溶液（Ｂ）；另量取标准氯化钾溶液（精密称取在150℃干燥1 小时的分析纯氯化钾 191mg ，置1000ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀） 5.0ml，置50ml量瓶中，加 （Ｂ）溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（Ａ）。照原子吸收分光光度法（附录Ⅳ D杂 质检查法）在766.5nm 的波长处分别测定，应符合规定。 有关物质检查方法建立的研发思路 ⑴首先有关物质的方法选择，对于仿制药有EP、BP、USP等质量标准的药品，首选以上的色谱条件进行筛选，尤其关注的离子对试剂的使用。 ⑵选用不同色谱条件进行对比研究，如果方法一是等度测定的，方法二最好选用梯度色谱条件，比较两种方法测定结果的杂质个数及杂质含量等。确证有关物质测定方法的准确性。 ⑶对所筛选的方法进行系统的方法学研究，比较不同检测方法的优劣，选择较好的色谱条件作为本品有关物质检查的测定方法。 ⑷对于仿制药同时要将自制样品与市售原研样品进行全面的质量比较，分析其杂质的种类和含量，确保自制样品与市售原研样品的杂质在同一水平。 有关物质分析方法的选择 ⑴高效液相色谱法（HPLC） 目前采用的分析方法主要以高效液相色谱法为主，为常用的分析方法。选择不同的色谱柱对杂质进行有效的分离。 ⑵薄层色谱法(TLC) 是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，但准确性较低。 ⑶气相色谱法(GC) 气相色谱法主要是用于能气化的物质的检测和分离。一般用于有机残留溶剂的检测和分离。也可用于一些能挥发的杂质的检测。 ⑷毛细管电泳法（CE） 毛细管电泳法是以弹性石英毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分的淌度和（或）分配行为的差异而实现各组分分离的一种分析方法。其应用比较广泛，但该方法测定精密度不高，专属性不稳定，且CE仪器价格较高。 为验证杂质分析方法的专属性，对于原料药，可根据其合成工艺，采用各步反应的中间体（尤其是后几步反应的中间体）、立体异构体、粗品、重结晶母液等作为测试品进行系统适用性研究，考察产品中各杂质峰及主成分峰相互间的分离度是否符合要求，从而验证方法对工艺杂质的分离能力 ⑥溶液稳定性试验 考察样品在配制溶剂中的杂质与主峰的稳定性，取一定浓度的样品溶液，分别于不同时间取样测定杂质与主峰的峰面积，以相对标准偏差来表示不同时间测定结果的稳定性。判断结果：结果RSD,%≤2.0%，在测定时间内的样品溶液稳定性良好。 C 精密度试验 D重复性试验 E 中间精密度 F 回收率试验 G 杂质的检测限 H 杂质的定量限 ② 加校正因子的主成分自身对照法 采用加校正因子自身对照法应进行相应杂质的校正因子的测定，仅适用于已知杂质的控制，如果校正因子在0.2～5.0的范围内也可用加校正因子的主成分自身对照法。 校正因子测定的要求 A 测定校正因子的各杂质与主成分的标准物质（对照品），应符合标准物质（对照品）的要求。B 确定校正因子的分析方法应与最终确定的质量标准方法一致，色谱条件等需经筛选优化后确定，如有变更，需考虑对校正因子的影响，必要时重新确定。C 要关注影响待测物UV吸收的各种因素，如溶液制备所用溶剂最好与最终确定的流动相相同，检测波长最好在特定杂质及主成分UV曲线的峰或谷处，避开吸收值急剧变化波段，以保证测定方法具有较好的耐用性，并保持测定结果的恒定。 校正因子的测定：A 单浓度点测定：制备适当浓度的特定杂质对照品溶液和主成分对照品溶液，分别进样测定，待测样品的绝对校正因子与参照样品绝对校正因子的比，得到校正因子。 B 多浓度点测定：制备适当的高