生物选修一 5-3 血红蛋白的提取与分离.pptVIP

课题3 血红蛋白的提取和分离;一. 蛋白质分离和提取的原理 ;（一）凝胶色谱法; 大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快； 小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部，路程长，流动慢。;;相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个;抵制外界酸碱对溶液pH的干扰而维持 pH稳定。 ;3)类型:;血液组成成分 ;蛋白质的提取和分离一般分为四步： （1）样品处理：洗涤红细胞；血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液 。 （2）粗分离：透析除去分子较小的杂质。 （3）纯化：通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。 （4）纯度鉴定： 通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。;阅读思考：洗涤的目的是什么？ ; 血红蛋白的释放 ;红细胞破 碎混合液; 取1ml的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300ml的物质的量浓度为20mmol/l的磷酸缓冲液中（pH为7.0），透析12小时;; 纯化——凝胶色谱法;①凝胶的选择：交联葡聚糖凝胶（G-75） ②凝胶的前处理：配置凝胶悬浮液 ③