仪器分析期考重点前十节.ppt

有关色谱方程的讨论： 1）分离度R 与柱效的关系 分离度R与理论塔板数n 有关，即R 受热力学性质的影响。 对具一定相对保留值? 的物质对，R与有效塔板数neff有关，说明neff可正确代表柱效能。 由色谱方程可得： 因此可通过增加柱长提高分离度。然而，分析时间也相应增加，且峰宽也展宽！为提高柱效，用减小塔板高度 H 的方法比增加柱长更有效。 2）分离度R与保留因子? 的关系 ? 越大，柱选择性越好，对分离有利。? 的微小变化可引起 R 较大改变。如，当? 从1.01增加至1.10(增加9% )时，R 则增加 9 倍(但?1.5, R增加不大) 。 改变? 的方法有：降低柱温、改变流动相及固定相的性质和组成。 3）分离度R 分配比 k 的关系 k 增加，分离度R 增加，但当k10，则R的增加不明显。通常k在2~10之间。 改变 k 的方法有：适当增加柱温(GC)、改变流动相性质和组成(LC)以及固定相含量。 氧的两个波在－0.17V～－1.21V之间，在此范围内是极谱分析中最常用的电位范围。 消除：a)?通入惰性气体如H2、N2、CO2 (CO2仅适于酸性溶液); b) 在中性或碱性条件下加入Na2SO3，还原O2; c) 在强酸性溶液中加入Na2CO3，放出大量二氧化碳以除去O2；或加入 还原剂如铁粉，使与酸作用生成H2，而除去O2； d) 在弱酸性或碱性溶液中加入抗坏血酸。 10.2 色谱法的特点 （1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。 （2） 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。 （3） 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 （4） 应用范围广 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 不足之处： 被分离组分的定性较为困难。 （一）从两相的状态分类： 色谱法中，流动相可以是气体，也可以是液体，由此可分为气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。固定相既可以是固体，也可以是涂在固体上的液体，由此又可将气相色谱法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱。分类情况如下： 色谱法 液相色谱法 气相色谱法 气-液色谱法 气-固色谱法 液-固色谱法 液-液色谱法 （二）按固定相的形式分类：按固定相的状态可分为： 柱色谱：固定相装在色谱柱中； 纸色谱：利用滤纸作载体，吸附在纸上的水作固定相； 薄层色谱：将固体吸附剂在玻璃板或塑料板上制成薄层作固定相。 （三）按分离原理分类：可分为： 吸附色谱法：利用吸附剂（固定相一般是固体）表面对不同组分吸附能力的差别进行分离的方法； 分配色谱法：利用不同组分在两相间的分配系数的差别进行分离的方法。 离子交换色谱：利用溶液中不同离子与离子交换剂间的交换能力的不同而进行分离的方法。 空间排斥（阻）色谱法：利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离的方法。 3）保留值 a. 死时间(t0) ：不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，其流速与流动相的流速相近。据 t0 可求出流动相平均流速 b. 保留时间tr：试样从进样到出现峰极大值时的时间。它包括组份随流动相通过柱子的时间t0和组份在固定相中滞留的时间。 c. 调整保留时间tr’ ：某组份的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组份在固定相中的滞留时间。即 由于保留时间为色谱定性依据。但同一组份的保留时间与流速有关，因此有时需用保留体积来表示保留值。 d. 死体积V0：色谱柱管内固定相颗粒间空隙、色谱仪管路和连接头间空隙和检测器间隙的总和。忽略后两项可得到： 其中，Fco为柱出口的载气流速（mL/min)，其值为： F0-检测器出口流速；Tr-室温；Tc-柱温；p0-大气压；pw-室温时水蒸汽压。 e. 保留体积Vr：指从进样到待测物在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相的体积。 f. 调整保留体积 ：某组份的保留体积扣除死体积后的体积。 g. 相对保留值r2,1：组份2的调整保留值与组份1的调整保留值之比。 区域宽度通常有三种表示方法： 标准偏差?：峰高0.607 倍处峰宽处的一半。 半峰宽W1/2：峰高一半处的峰宽。W1/2=2.354 ? 峰底宽W：色谱峰两侧拐点上切线与基线的交点间的距离。W= 4? 式中：tR为某组分的保留时间； W1