1株耐高温产蛋白酶细菌的筛选鉴定及其液体发酵条件的优化.pdfVIP

河南农业科学，2016 ， 45(11) :116~21 ， 125 Journal of Henan Agricultural 5ciences doi: 10. 15933/j. cnki. 1004-3268.2016. 11.023 1 株耐高温产蛋白酶细菌的筛选鉴定 及其液体发酵条件的优化 敖静，桓明辉，李杨，刘晓辉，高晓梅，徐冲 (辽宁省微生物科学研究院，辽宁朝阳口2000) 摘要:为高效发酵鸡粪，在鸡粪发酵高温时期( ~50 C )筛选到 11 株菌株，确定其中 1 株高温细菌 GX7 具有较高的蛋白酶活力。经 165 rDNA 测序并进行同源性比较可知，GX7 与枯草芽抱杆菌 (Bacillus subtilis) 的 165 rDNA 序列相似性达到 100% ;通过构建系统发育进化树，结合生理生化试 验，鉴定 GX7 为枯草芽抱杆菌。通过绘制细菌生长曲线、测定细菌蛋白酶活力可知，细菌 GX7 的 蛋白酶活力与菌数呈强正相关。从发酵培养基的组成及菌株的培养条件等方面优化枯草芽抱杆菌 GX7 产蛋白酶的条件，结果显示，最优培养基配方为:酵母浸膏1.5% 、玉米粉1. 5% 、 Mg50 0.5% ; 4 最优培养条件为 :pH 值 8. 1 、培养温度 37 C、接菌量 2% 、装液量 50 mL( 250 mL) 、摇床转速 140 9 r/min。在此条件下，活菌数提高 1 个数量级，达到 2.56 X 10 cfu/mL ，蛋白酶活力提高约 3 倍，为 26 U/mL o 关键词:耐高温;蛋白酶;细菌;鉴定;发酵条件优化 中图分类号: 581 1. 7 文献标志码:A 文章编号: 1004 -3268(2016)11 -0116 -07 Screening and Identification of A High Temperature Resistance Protease- producing Bacteria and Optimization of Its Liquid Fermentation Condition AO Jing ,HUAN Minghui ,LI Yang ,LIU Xiaohui , GAO Xiaomei ,XU Chong ( Microbial Research Institute of Liaoning Province , Chaoyang 122000 , China) Abstract: To improve chicken manure fermentation , 11 strains were screened in chicken manure fermentation during the period of high temperature ( ~ 50 C) , of which thermophilic bacteria GX7 with high protease activity by 165 rDNA sequencing and homology comparison ,the sequence homology of GX7 with Bαcillus subtilis of 100% . GX7 was identified as Bαcillus subtilis by phylogenetic tree and combined with phy