假单胞菌M18调控基因ppbR的克隆与功能研究.PDFVIP

微生物学通报 FEB 20, 2008, 35(2) 235~240 Microbiology ©2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 假单胞菌 M18 调控基因ppbR 的克隆及功能研究 郑 斐 黄显清 许煜泉 张雪洪* ( 200240) 摘 要: 假单胞菌 (Pseudomonas sp.) M18 是促进植物生长的根际细菌, 能产生吩嗪-1-羧酸 (PCA) 和藤黄绿菌素 (Plt) 两种不同的抗生素。根据生物信息学分析, 铜绿假单胞菌PA2572 基因 编码蛋白可能是一个双元调控系统的应答调节子。本研究从假单胞菌M18 基因组中扩增出PA2572 同源基因片段ppbR , 利用体外定点插入突变和同源重组技术构建了M18 的ppbR 突变株M18P 。 研究结果表明, 突变株M18P 在泳动能力和群集运动能力上有显著的下降。突变株合成PCA 的能 力比野生型有显著的下降, 在发酵液中 PCA 积累量仅为野生型的 50%。在KMB 培养基中, 突变 株Plt 的积累量和野生型没有显著的差异。 关键词: 假单胞菌M18, ppbR , 双元调控系统, 泳动能力, 群集运动能力, 吩嗪-1-羧酸 Construction and Characterization of a ppbR gene Mutant of Pseudomonas sp. M18 * ZHENG Fei HUANG Xian-Qing XU Yu-Quan ZHANG Xue-Hong (Key Laboratory of Microbial Metabolism, Ministry of Education, College of Life Science and Biotechnology, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240) Abstract: Pseudomonas sp. M18, one of plant-growth-promoting rhizobacteria, can produce secondary me- tabolites including phenazine-1-carboxylic acid (PCA) and pyoluteorin (Plt). PA2572 gene coding protein is a probable two-component response regulator in Pseudomonas according to homologous speculations. In order to investigate its genetic function, PA2572 homolo