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微生物的生理特点
第二章 微生物生理 生理特性 生理——生命活动机理(食、住) 生命活动——营养、呼吸、环境卫生 营养物及其获取方式——营养 营养物质的代谢 ——呼吸 那些环境因素使细菌病、死?——环境卫生 营养物的种类、用途及营养物的吸收方式 水、盐、“粮食” 异养-自养;吸收方式—四种 如何代谢?不同代谢类型的细菌分类 光能—化能;好氧—厌氧;寄生—腐生 !学会养细菌 住(环境卫生—环境因素对细菌的影响) 第一节 微生物的营养 提问:如何知道细菌所需的营养物种类呢? 由细胞化学组成进行推断。 一、细菌营养物组成及生理功能 传统上根据功能不同对营养物归类 水、无机盐和碳源、氮源、能源、生长因子等。 (一)水 提问:水对细菌有哪些作用? 1)溶剂作用 2)运输物质的载体 3)参与生化反应(如脱水、加水反应) (二)无机盐 阴离子盐:磷酸盐、硫酸盐、氯化物、碳酸盐、碳酸氢盐。 阳离子盐:氨、钾、钠、钙、镁、铁的盐 P和S、Fe、Mg的需求量较大 同时还需要锌、锰、钴、铝、铜、硼、钒、镍等微量元素。 (三)碳源 1)碳源 种类? 有机物、无机碳化合物 随细菌不同,各有偏好 细菌最喜好的碳源是? (四)氮源 提问:哪些物质可作为细菌的氮源? 有机氮(氨基酸和蛋白质)、无机氮( N2、 NH3、铵盐、硝酸盐)等。 实验室中有机氮源——蛋白胨 (五)生长因子 种类:嘌呤、嘧啶类、维生素类 作用:? 嘌呤和嘧啶参与合成核酸和辅酶; 维生素,重要辅酶 多数细菌不存在生长因子问题。 只有少数细菌需要外界提供现成的生长因子,才能生长,如乳酸菌需要多种维生素,因此只能生活在这些物质供应充足的环境,如牛奶中、肠道。 三.培养基 学以致用——养细菌 (一)认识 化能自养菌氧化硫杆菌的培养基 粉末状硫 10g KH2PO4 4g MgSO4 0.5g CaCl2 0.5g (NH4)2SO4 0.4g FeSO4 0.01g 水 1000mL(自来水即可) 异养细菌的培养基中至少有一种有机物,实验室中通常是葡萄糖 如一种大肠杆菌培养基 葡萄糖 0.5g K2HPO4 1g MgSO4 0.2g NaCl 5g NH4H2PO4 0.4g 水 1000mL (三)配制 (四)分类 提问:根据哪些特性可以给培养基分类? 物理状态、用途、组分组成 1、根据物理状态 固体培养基、半固体培养基和液体培养基 1)液体培养基(“汤”) ——废水也可看作是一种广义的液体培养基 2)固体培养基(“团”) 人工做法——(与果冻方法一样) 向液体培养基中加入2%左右的琼脂,加热至100℃溶解,40℃下冷却并凝固。 石花菜(红藻)→琼脂 琼脂特性 3)半固体培养基(“膏”) 半——流动性介于固体与液体之间 提问:如何制作? 在液体培养基中加入0.5%或更低浓度的琼脂 作用:? 半固体培养基中可以融入少量的溶解氧,因此这种培养基常被用于培养在较低氧浓度环境下才能最佳生长的细菌。 2、根据培养基组分 天然培养基、合成培养基和半合成培养基。 1)合成 合成——纯化学试剂 2)天然 天然——? 纯生物制品(细胞提取物) 如,常用的细菌肉汤培养基 牛肉膏 3g 蛋白胨 5g 水 1000mL pH 7.2~7.4 牛肉膏——瘦牛肉经过加热浓缩抽提的膏状物(主要作碳源) 优点——营养丰富、配制容易 缺点? 质量不稳定、选择性差; 3)半合成 半——不纯 优缺点介于前两者之间,因而使用最广。 3、根据培养基用途 普通型、选择型、鉴别型 普通——普适 ① 投毒法(“正-考试”) 常用物质为染料、胆汁酸盐、金属盐类、酸、碱和抗生素。 例如欲分离古细菌,培养基中通常加入青霉素(由于古细菌的细胞壁不同于普通细菌,因而不会被对破坏普通细菌细胞壁结构的青霉素杀死),古细菌就唯一分离并存活下来。 胆汁酸盐——抑制革兰氏阳性菌 提问:它能选择性生长那种细菌? 革兰氏阴性细菌 ②投其所好法(“邪—挖墙角”) 好→→→营养、环境因子 (1)专一性营养源培养法 待选细菌专门需要的某种碳源或氮源 例如筛选纤维素分解菌选用纤维素作为培养基中的唯一碳源; 各类降解石化废水特殊有机物的细菌筛选通常是以这类有机物为培养基中的唯一碳源,将目的细菌富集筛选下来。 (2)理化因素控制法 理化因素——特殊的温度、氧气、pH、盐度等环境条件 主要用于筛选极端环境微生物。如嗜盐、嗜热、嗜冷、嗜酸、嗜碱等的细菌,同时也被用于选择性培养好氧或厌氧细菌。 2)鉴别培
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