拟态弧菌溶血素VMH蛋白B细胞线性表位的预测和鉴定.PDFVIP

安徽农业大学学报, 2017, 44(2): 208-213 Journal of Anhui Agricultural University [DOI] 10.13610/ki.1672-352x009 网络出版时间：2017/4/19 11:55:01 [URL] /kcms/detail/34.1162.S1155.018.html 拟态弧菌溶血素 VMH 蛋白 B 细胞线性表位的预测与鉴定 * 曹 际，陶会竹，赵雨婷，肖 宁，李槿年 (安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036) 摘 要：为了定位拟态弧菌热不稳定溶血素 VMH 蛋白的 B 细胞线性表位，以 VMH 蛋白全长氨基酸序列为基 础，联合利用ABCpred 和BepiPred 网络服务器综合分析预测VMH 蛋白 B 细胞线性表位。同时，以霍乱弧菌Cytolysin 蛋白为同源建模模板，利用 Modeller 9.14 软件构建 VMH 蛋白的 3D 结构，并使用 PyMol 软件展示预测表位，确定 其在 3D 结构中的位置。共预测出 6 个最有可能的 B 细胞线性表位，它们分别位于 VMH 蛋白 N 端 P130-141、P192-203、 P236-247 、P281-292 、P425-436 和 P464-475 区域，且完全或大部分暴露于蛋白3D 结构表面。人工合成 6 条预测表位肽，分 别采用肽 ELISA 、肽抑制性免疫印迹反应和溶血活性试验进行鉴定。结果发现 6 个预测表位肽均能与兔抗 VMH 蛋 白抗体发生结合反应；除预测表位P281-292 外，其余 5 个预测表位肽能明显抑制兔抗 VMH 蛋白抗体与 VMH 蛋白间 的免疫印迹反应，且具有溶血活性。结果表明，预测表位 P130-141、P192-203、P236-247 、P425-436 和 P464-475 是拟态弧菌 VMH 蛋白的真正 B 细胞线性表位。 关键词：拟态弧菌；VMH 蛋白；B 细胞线性表位；免疫反应性；溶血活性 中图分类号：S917.1 文献标识码：A 文章编号：1672352X (2017)02020806 Prediction and identification of linear B-cell epitopes of Vibrio mimicus hemolysin VMH protein CAO Ji, TAO Huizhu, ZHAO Yuting, XIAO Ning, LI Jinnian (School of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036) Abstract: In order to locate the B-cell linear epitopes of Vibrio mimicus heat-labile hemolysin protein (VMH), B-cell linear epitope prediction was performed with comprehensive ABCpred and BepiPred web servers according to the full-length amino acid sequence of the protein. Meanwhile, taking cytolysin protein from Vi- brio.cholerae as a template, a 3D structure model of VMH protein was constructed using Modeller 9.14 soft