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生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程 本规程适用于人用生物制品生产用动物细胞基质及检定用动物细胞，包括具 有细胞库体系的细胞及原代细胞。细胞基质系指可用于生物制品生产的所有动物 或人源的连续传代细胞系、二倍体细胞株及原代细胞。 生产非重组制品所用的细胞基质，系指来源于未经修饰的用于制备其主细胞 库的细胞系/株和原代细胞。生产重组制品的细胞基质，系指含所需序列的、从 单个前体细胞克隆的转染细胞。生产杂交瘤制品的细胞基质，系指通过亲本骨髓 瘤细胞系与另一亲本细胞融合的杂交瘤细胞系。 一、对生产用细胞基质总的要求 用于生物制品生产的细胞系/株均须通过全面检定，须具有如下相应资料， 并经国务院药品监督管理部门批准。 （一）细胞系/株历史资料 1. 细胞系/株来源资料 应具有细胞系/株来源的相关资料，如细胞系/株制备机构的名称，细胞系/ 株来源的种属、年龄、性别和健康状况的资料。这些资料最好从细胞来源实验室 获得，也可引用正式发表文献。 人源细胞系/株须具有细胞系/株的组织或器官来源、种族及地域来源、年 龄、性别及健康状况及病原体检测结果的相关资料。 动物来源的细胞系/株须具有动物种属、种系、饲养条件、组织或器官来源、 地域来源、年龄、性别、供体的一般健康状况及病原体检测结果的相关资料。 如采用已建株的细胞系/株，应具有细胞来源的证明资料。应从能够提供初始细 胞历史及其溯源性书面证明材料的机构获得，且应提供该细胞在该机构的详细传 代记录，包括培养过程中所使用的所有原材料的详细信息，如种类、来源、批号、 生产日期及有效期、制备或使用方法、质量标准及检测结果等。 2．细胞系/株培养历史的资料 应具有细胞分离方法、细胞体外培养过程及建立细胞系/株过程的相关资料， 包括所使用的物理、化学或生物学手段，外源插入序列，筛选细胞所进行的任何 遗传操作或筛选方法、在动物体内传代过程以及细胞生长特征、培养液成分等。 同时还应具有细胞鉴别、内源及外源因子检查结果的相关资料。 应提供细胞传代历史过程中所用的细胞培养液的详细成分并应具有朔源性。 如使用人或动物源性成分，如血清、胰蛋白酶、乳蛋白水解物或其他生物学活性 的物质，应具有这些成分的来源、批号、制备方法、质量控制、检测结果和质量 保证的相关资料。 （二）细胞培养操作要求 细胞取材、建库及制备全过程应具有可溯源性及操作的一致性、并对各个环 节的风险进行充分的评估。 1．细胞来源供体 所有类型细胞的供体应无传染性疾病或未知病原的疾病。神经系统来源的细 胞不得用于疫苗生产。 2．原材料的选择 与细胞培养相关的所有材料，特别是人源或动物源性材料，应按照本版药 典的相关要求进行风险评估，选择与生产相适应的原材料，必要时进行检测。所 有生物源性材料均应无细菌、真菌、分枝杆菌、支原体及病毒等外源因子污染。 细胞培养过程中所用的牛血清及胰酶应符合本版药典的相关要求。 细胞培养液中不得含有人血清。如果使用人血白蛋白，应使用获得国家药 品管理当局批准的人用药品。 用于生物制品细胞制备过程中不得使用青霉素或β -内酰胺(β -Lactam)类 抗生素。配制各种溶液的化学药品应符合《中国药典》（二部）或其他相关国家 标准的要求。 3．细胞培养体系： 应控制对细胞生长有重大影响的关键的已知可变因素，包括规定细胞培养液 及其添加成分的化学组成及纯度，记录所有制备的培养用试剂并通过检定放行， 规定细胞培养的理化参数（如 pH、温度、湿度、气体组成等））的变化范围并进 行监测，以保证细胞培养条件的稳定性。 4．细胞收获及传代 应结合生产工艺的特性，尽可能减少对细胞的操作。细胞收获及传代应采用 可重复的方式,以保证收获时细胞的汇合率、孵育时间、温度、离心速度、离心 时间以及传代后活细胞接种密度具有一致性。 传代细胞的体外细胞龄可采用细胞群体倍增水平或传代水平计算。 二倍体细胞的细胞龄通常以群体倍增水平计算，也可以每个培养容器细胞 群体细胞数为基础，每增加一倍作为一世代粗略估算，即一瓶细胞传二瓶 (1:2 分种率)，再长满瓶为一世代；一瓶传四瓶(1:4)为二世代；一瓶传八瓶 (1:8)则 为三世代。生产用细胞龄限制在细胞寿命期限的前 2/3 内。 连续传代细胞系的细胞龄可以群体倍增水平计算，也可以按照固定的传代 比率进行传代，每传一次视为一代。 5．