环境分析与监测PPT汇报剖析.pptx

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)相关介绍;1;1;背景介绍;按溶质在两相分离过程中的物理化学原理分类： 1、吸附色谱（Adsorption Chromatography） 2、分配色谱（Partition Chromatography） 3、离子色谱（Ion Chromatography） 4、体积排阻色谱（Size Exclusion Chromatography） 5、亲和色谱（Affinity Chromatography）;按分离过程物理化学原理分类的各种液相色谱法的比较;2;HPLC有以下特点： 1.高压——压力可达150~300 Kg/cm2。色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。 2.高速——流速为0.1~10.0 ml/min。 3.高效——可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 4.高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 ;HPLC与经典液相色谱相比有以下优点： 1.速度快——通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。 2.分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。 3.灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。 4.柱子可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。 5.样品量少，容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。 ;3;1.贮液瓶 2.高压输液泵 3.进样器 4.色谱柱 5.检测器 6.记录装置;● 贮液瓶：存储样品 ● 高压输液泵：驱动流动相和样品通过色谱分离柱和检测系统； ● 进样器：将待分析样品引入色谱系统； ● 色谱柱：分离样品中的各个物质； ● 检测器：将被分析组在柱流出液中浓度的变化转化为光学或电学信号； ● 馏分收集器：如果所进行的色谱分离不是为了纯粹的色谱分析，而是为了做其它波谱鉴定，或获取少量试验样品的小型制备，馏分收集是必要的； ● 数据获取和处理系统功能：把检测器检测到的信号显示出来。;高效液相色谱法的结构;4;通常在确定被分析的样品以后，要建立一种高效液相色谱分析方法必须解决以下问题： ①根据被分析样品的特性选择适用于样品分析的一种高效液相色谱分析方法。 ②选择一根适用的色谱柱，确定柱的规格（柱内径及柱长）和选用固定相（粒径及孔径）。 ③选择适当的或优化的分离操作条件，确定流动相的组成、流速及洗脱方式。 ④由获得的色谱图进行定性分析和定量分析。 ;;5;高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂，抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。 高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75%～80%）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。;目前已有的研究运用： 1．环境中有机氯农药残留量分析固定相。 2．稠环芳烃的分析稠环芳烃多为致癌物质。 3．阴离子分析。 ;