分子细胞生物学复习资料.docVIP

分子细胞生物学 分子细胞生物学的研究方法； 近年来蛋白质和核酸的结构和功能研究进展； 生物膜运输物质的分子机理； 细胞各部位蛋白质的合成和定向运输的分子机理； 细胞核的分子结构以及细胞核和细胞质之间物质运输的分子基础； 细胞信号传导的分子机理。 第一章 分子细胞生物学学科简介和研究方法 本章重点难点：分子水平上的操作技术。 分子细胞生物学的研究对象和内容 p1-2 分子细胞生物学与其他学科的关系 p1-2 分子细胞生物学的研究方法- （一）、研究细胞的组成和结构 荧光显微镜下鉴别细胞的组成和结构p2-4 免疫荧光法 活细胞研究 检测局部Ca2+浓度和细胞内的pH 共聚焦扫描显微镜展示细胞内物质的立体分布 在电子显微镜下鉴别细胞中的各种蛋白质的分布和超微结构p4 利用抗体和抗原特异性结合的原理，电子致密度大的物质（金颗粒）作为标记， 蛋白A起桥梁作用（蛋白A能同抗体Fc片段结合）。 3．鉴定蛋白质的亚细胞定位或特殊细胞定位p5 （1）将目标基因与标记基因（荧光蛋白基因GFP、RFP、YFP）融合， 确定目标蛋白质的亚细胞定位 （2）用目标基因的启动子驱动标记基因，确定目标蛋白质在不同细胞中的分布， 时空表达特点等 （3）荧光显微镜或共聚焦扫描显微镜 例如：GUS，葡糖醛酸酶，可催化化学反应，加入底物后有GUS表达的位置显蓝色。 4.蛋白质亚细胞定位和超微结构定位的对比鉴定p6 标