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植物组织培养概念：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术，又称为植物离体培养。 外植体（explant）:用于离体培养的那部分植物器官、组织或细胞。 愈伤组织（callus）；是指外植体因受伤或在离体培养时其细胞进行活跃的分裂增值而形成的一种无特定结构和功能的组织。 植物组织培养的特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞。这一特点具体表现在以下几个方面：（1）组培技术是无菌操作技术；(2)组培材料处于完全的异养状态；（3）组培材料可以是离体状态的器官、组织、细胞或原生质体；（4）组培培养物可以形成克隆(clone,无性繁殖系)，也可以进行茎芽增殖或生根；(5)组培容器内的气体和环境气体可以通过封口材料进行交换，相对湿度通常是几乎100%,因此，组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质层，且气孔保卫细胞功能缺乏,气孔始终都是张开的；（6）组培的环境温度，光照强度和时间都是人为设定的，其参数可调。 德国植物学家Haberlandt被公认为是植物组织培养之父，他与1902年发表的植物组织培养的第一篇论文：提出了植物细胞具有全能性，构思了细胞培养的概念。 培养基是植物组织培养的核心，它提供植物生长所需的营养物质，是决定植物组织培养成败的关键因素之一。外植体之所以能沿着不同的组培途径生长、分化，其主要原因就在于培养基中的物质成分对细胞的生长发育起着定向操控作用。 在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同。因此，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一种合适的培养基，培养才有可能成功。 培养的构成：（1）水分；（2）无机盐类：a大量元素b微量元素;（3）有机营养成分：a糖类物质：蔗糖 葡萄糖 果糖 麦芽糖b维生素类c氨基酸类；(4)植物生长调节剂：a生长素:IAA NAA 2,4-D IBA抑制芽 b细胞分裂素：6-BA ZT KT促进芽分化；（5）天然有机添加物：椰子汁 香蕉泥 番茄汁 胶木提取液等；（6）pH值：常用5.8 过高培养基变硬，过低培养基不凝固；（7）凝固剂：常用琼脂(粉) 7-10g\L;(8)其他添加物：活性炭。 配培养基的琼脂一般称取0.7%，蔗糖3%。 培养基母液的配制：（1）大量元素 合并配制；（2）微量元素 合并配制；（3）钙盐（氯化钙；（4）鉄盐（螯合铁）；（5）有机成分 分别配制；（6）生长调节剂 分别配制。 培养基的配制：琼脂——蔗糖——按顺序取母液到烧杯中——容量瓶定容——调pH值——分装、封口——灭菌20min 高压灭菌锅一般灭菌20 min. 外植体的成苗途径： 芽、根 (1)愈伤组织途径:外植体——愈伤组织—— 芽——根——试管苗 根——芽 （2）胚胎发育途径：外植体——胚状体——试管苗 （3）直接成苗途径（如茎尖培养）：外植体——根、芽——试管苗 经过初代培养外植体可能会出现褐变、玻璃化、污染等现象 污染：植物培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌导致培养失败的现象。 原因：空气中病原菌污染（细菌、真菌）；外植体、培养基、培养器皿带菌；操作人员未遵守操作规程。 污染的预防措施：《1》防止材料带菌2防止用具带菌《3》接种室处于无菌状态《4》培养物处理后应及时淘汰并作高压灭菌处理《5》操作人员应按操作程序进行 褐变;指外植体在培养过程中体内的多分氧化被激活后，使细胞内的酚类物质氧化成棕褐色醌类的物质，褐化物不断向外扩散培养基变成褐色，严重影响外植体脱分化最后变色死亡。 预防措施：（1）选择适宜的外植体及最佳培养基（适当降低培养基无机盐浓度，降低pH值，降低细胞分裂素水平等，可显著减轻培养物褐变）（2）连续转移（3）加抗氧化剂，如硫代硫酸钠、抗坏血酸（4）加活性炭（5）加多酚类物质，如精氨、亚精胺。 玻璃化：指植物培养过程中的特有的一种生理失调或生理病变，试管苗呈现半透明状外观形态异常的现象。预防措施：（1）适当控制培养基无机盐浓度（氯浓度尤其铵态氮浓度不能过高）（2）适当控制培养基中蔗糖和琼脂浓度（3）适当降低细胞分裂素和赤霉素浓度（4）增加自然光照，控制光照时间（5）控制好温度（6）改善培养皿的气体交换状况（7）在培养基中添加其他物质 植物细胞全能性：即植物体细胞具有全部的遗传信息，在适当的条件下，具有不断分裂和繁殖、发育成完整植株的能力。 植物生长调节剂有明显调节作用。如生长素与分裂素比值高，促进生根；低，促进长芽。 离体培养中再生植株的主要途径：器官