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上消化道活检组织免疫组化染色
选择那些抗体?
应根据HE组织切片检查结果,有目的的选择。
行进一步免疫组织化学(IHC)染色的目的包括以下几点:
判断组织来源
例如:根据广谱CK(CK混)和Vimentin染色结果,鉴别组织是上皮,还是间质来源;
若为上皮来源,根据CK5-6和CK8-18,鉴别是鳞状上皮,还是腺上皮来源;
或根据CK7和CK20,鉴别上消化道,还是下消化道来源;
或根据AFP,鉴别胃肠道粘膜上皮细胞,还是肝细胞起源;
或根据Syn,CgA,鉴别是否为神经内分泌细胞起源。
鉴别良恶性
例如:常见肿瘤标志物,如CEA,CA19-9,CA72-4,CA12-5等;
反应细胞增殖状态的Ki-67;
监控细胞凋亡的P53等。
指导治疗(靶向治疗)
如HER2 赫赛汀
EGFR 西妥昔单抗
TNF-α 英夫利昔
注意事项
抗体不仅在(可疑)病变区域表达,整张切片中符合要求的正常组织也可以表达。即判断抗体表达阴性或是阳性时,需要清楚抗体在目的区域的表达情况。即所要观察可疑病变组织中的表达情况。例如,CK在正常上皮组织中也有表达;Ki-67在腺颈部干细胞区表达活跃,甚至在肠上皮化生部位也呈阳性表达;在正常组织细胞中,Syn和CgA也有灶状表达。
同理,所谓的肿瘤标志物在正常人的血清和组织中都可以表达,只不过是在一定范围内表达。超过这一范围,则认为一定有问题,或考虑有问题的可能性大;反过来,肿瘤标志物阴性不能下结论,说:“这个患者的这个组织一定没问题!”因为导致肿瘤形成的因素很多,也十分复杂,某些标志物阴性,只能说明已知病变没有通过这些标志物所在的通路导致病变发生。而病理诊断还要结合HE形态学观察结果,以及患者的临床表现和影响学检查结果综合判断。
验证一个问题的一组抗体,或者多个抗体,表达情况可能不一致,需要综合分析。例如,验证组织细胞为神经内分泌细胞起源时,可能存在Syn(+)、CgA(-)的情况。
染色结束后,还需要复染细胞核,以确定抗体表达的亚细胞定位。
Ki-67阳性率:每次计数一个视野中100个肿瘤细胞中有已知抗体表达的细胞数量,但不能把间质细胞也算入肿瘤细胞中参与计数。
边缘效应问题:通常为制片过程中,组织边缘出现干片现象造成,阅片时应根据情况加以鉴别。
抗体选择的原则:从正反两方面加以证明:选择一些标志物证明......,另外一些标志物证明不是......
总之,应根据实际情况有目的的选择抗体,用于明确诊断及指导个体化治疗。
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