苏云金芽孢杆菌晶体杀虫蛋白Cry1Ac基因在虫生真菌球孢白僵菌中的表达.pdfVIP

1 文献综述 随着大量使用化学合成农药，造成的环境污染和害虫抗药性提高等问题日益 突出，生物防治越来越受到重视。虫生真菌是自然界中昆虫种群数量得以控制的 [1] 主要因素之一，也是害虫生物防治的重要手段 。目前己鉴定的虫生真菌有700 [2] 余种，而其中只有10余种用于防治害虫 ，因此虫生真菌的资源大有潜力可挖。 同时与其它杀虫微生物相比，虫生真菌具有体外产孢扩散传播力强，土壤宿存能 [2] 力较长、扩散效果可观、寄主不易产生抗性和容易生产等优点 。因此，虫生真 菌作为一种潜力巨大的生物防治手段倍受关注。但另一方面，同细菌、病毒杀虫 剂相似，虫生真菌也存在杀虫效果慢、受环境影响较大和效果不稳定等弱点，因 而一定程度上限制了真菌杀虫剂的大规模应用。因此，有必要弄清虫生真菌侵染 寄主过程中的分子机制[3-4] ，从而有目的地通过基因工程手段对生产菌株进行遗 传改良，获得高效工程菌，加速真菌杀虫剂的产业化步伐。本文将着重介绍近年 来有关虫生真菌致病分子机理和基因工程改良的重要进展和前景。 1.1 生物防治技术的历史 生物防治包括以虫治虫和以菌治虫。其主要措施是保护和利用自然界 害虫的天敌、繁殖优势天敌、发展性激素防治虫害等，是人类依靠科技进 步向病虫草害做斗争的重要措施之一 。以菌治虫是80年代新兴的生物防治 技术。它是利用昆虫的病原微生物杀死害虫。这类微生物包括细菌、真菌、 病毒、原生动物等，多半对人畜安全性无明显影响，使用时比较安全，无 残留毒性，害虫对它们多不产生抗性，因此，微生物农药的应用具有广阔 的前景。 昆虫和螨类的病原物包括细菌、真菌、病毒、原生动物和线虫等生物， 它们多数对人畜无不良影响，使用时比较安全，无残留毒性 。除少数细菌， 例如苏云金芽孢杆菌 （Bacillus thuringiensis ）外，害虫对它们难以产生抗性。 另外，许多病原物都可以在人工培养基上培养和大量生产，特别是苏云金 芽孢杆菌、球形芽孢杆菌 （B. sphericus ）、球孢白僵菌、金龟子绿僵菌 (Metarhizium anisopliae)等已在不少国家实现了工业化生产，形成具有一定规 模的微生物农药产业，在有害生物综合治理中占有重要地位，具有广阔的 前景。 1.2 虫生真菌的应用前景 我国作为世界最大的真菌杀虫剂生产国和使用国，近年来在真菌杀虫剂的产 1 业化方面取得较大进展，生产虫生真菌制剂是一项具有广阔前景的绿色产业。从 环保的角度来看，具有重要的生态建设意义；从生产厂家的角度来看，具有较高 经济价值。虫生真菌在害虫防治中所创造的社会效益和生态效益，是化学防治无 [5] 法比拟的，在实施森林有害生物综合管理体系中，具有重要的地位和作用 。因 此，虫生真菌的开发应用的市场前景是十分广阔的，其意义也是深远的。 真菌主要通过体壁侵入昆虫，因而具有其它昆虫病原无可比拟的独特优越 性。然而，真菌也具有杀虫效果慢、受环境影响较大，效果不稳定等明显弱点。 因此，针对这些问题有目的地对生产菌株进行遗传改良，获得高效工程菌并研制 [4] 高活性新剂型，是克服这些弱点的关键，将大大加速真菌杀虫剂的产业化步伐 。 1.3 虫生真菌基因工程的研究进展 为了加强虫生真菌致病作用和抗逆性的研究，必须利用现代生物科学 和生物技术，发现与真菌对昆虫的毒力有关的基因以及与抗逆性有关的基 因，并利用遗传技术，特别是基因工程技术来改良菌株，从而提高真菌杀 虫剂的质量和提高利用真菌防治害虫的效率和效果。涉及虫生真菌基因工程 研究的报道目前主要体现在三个方面：一是将虫生真菌作为宿主细胞接受外源基 因的试验，并进而研究外源基因的稳定性；二是将其他昆虫病原微生物的毒力因