生物化学课件糖 脂 柠檬酸带线.ppt

RNA的生物合成 (转录) 在RNA聚合酶的催化下，以一段DNA链为模板合成RNA，从而将DNA所携带的遗传信息传递给RNA的过程称为转录（transcription）。 经转录生成的RNA有多种，主要的是rRNA，tRNA，mRNA，HnRNA等。 第一节 RNA转录合成的特点 转录（transcription）的不对称性就是指以双链DNA中的一条链作为模板进行转录，从而将遗传信息由DNA传递给RNA。 对于不同的基因来说，其转录信息可以存在于两条不同的DNA链上。 RNA转录合成时，只能以DNA分子中的某一段作为模板，故存在特定的起始位点和特定的终止位点。 特定起始点和特定终止点之间的DNA链构成一个转录单位，通常由转录区和有关的调节顺序构成。 这是一种不同于引物酶的依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP）。 该酶在单链DNA模板以及四种核糖核苷酸存在的条件下，不需要引物，即可从5→3聚合RNA。 原核生物中的RNA聚合酶全酶由五个亚基构成，即?2???。 ?亚基与转录起始点的识别有关，在转录合成开始后被释放；余下的部分（?2??）被称为核心酶，与RNA链的聚合有关。 真核生物中的RNA聚合酶可按其对?-鹅膏蕈（xun）碱的敏感性而分为三种，它们均由10~12个大小不同的亚基所组成，结构非常复杂，其功能也不同。 在真核生物中，转录的起始过程较为复杂，现已发现数百种蛋白因子与RNA转录合成有关。凡是与基因表达调控相关的蛋白因子统称为反式作用因子（transacting factor）。 原核生物中的终止因子?蛋白是一种六聚体的蛋白质，亚基的分子量为50kd。 ?蛋白能识别转录终止信号，并与RNA紧密结合，导致RNA的释放。 第三节 RNA转录合成的过程 在原核生物中，若干功能相关的结构基因常常串联在一起，由其上游的同一调控序列进行调控，这种基因的组织形式称为操纵子（operon）。 DNA分子中参与转录调控的序列统称为顺式作用元件（cis-acting element）。 原核生物转录起始时，首先由RNA聚合酶中的?因子识别转录起始点，并促使核心酶结合形成全酶复合物。 典型启动子的结构 -35 -10 转录起点 TTGACA 16-19bp TATAAT 5-9bp -10序列： -10序列是由Pribnow和Schaller（1975）发现，故也称为Pribnow框盒（Pribnow box）。 保守序列为TATAAT 位于-10bp左右，A.T较丰富，易于解链。其功能是: (1) RNA pol紧密结合; (2) 形成开放启动复合体； (3) 使RNA pol定向转录。 -35序列 -35序列又称为Sextama盒（Sextama box）， 其保守序列为（TTGA65C54A45） 其功能是: (1) 为RNA pol的识别位点。 σ亚基识别-35序列，为转录选择模板 (2)-35和-10序列的距离是稳定的，此与RNA pol的结构有关。 ?因子从全酶上脱离，余下的核心酶继续沿DNA链移动，按照碱基互补原则，不断聚合RNA。 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 RNA转录合成的终止机制有两种： 1．依赖Rho因子的转录终止：由终止因子（?因子）识别特异的终止信号，并促使RNA的释放。 模板DNA链在接近转录终止点处存在相连的富含GC和AT的区域，使RNA转录产物形成寡聚U及发夹形的二级结构，引起RNA聚合酶变构及移动停止，导致RNA转录的终止。 二、真核生物的转录过程 1. 转录起始的上游区段： 真核生物的转录起始点上游-25bp区也存在一段富含TA的顺序，被称为Hogness盒或TATA盒，通常认为是启动子的核心序列。 真核生物转录起始时，首先由TFⅡD的TBP亚基识别并结合TATA盒，然后在其他转录因子的配合下，与RNA聚合酶Ⅱ组装形成转录起始前复合物(pre-initiation complex, PIC)。 RNA聚合酶Ⅱ催化第一个磷酸二酯键形成。 RNA聚合酶Ⅱ的羧基末端结构域（CTD）被磷酸化修饰，大部分转录因子脱离，聚合酶向下游移动延伸RNA链。 （二）转录延长 真核生物转录延长过程与原核生物类似，但由于存在核小体的高级结构，故在转录延长过程中可观察到核小体移位和解聚现象。 （三）转录终止 真核生