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QuEChERS―高效液相色谱―串联质联法测定灵芝中多菌灵残留 　　[摘 要]建立QuEChERS-高效液相色谱-串联质联法测定灵芝中多菌灵残留的分析方法。样品经酸化乙腈提取，采用乙二胺 -N-丙基硅烷 （PSA）和无水硫酸镁吸附剂净化，以乙腈-1‰（v/v）甲酸水溶液作为流动相，在0.2mL/min流速下等度洗脱，采用C18色谱柱分离，电喷雾正离子源 （ESI+ ）、反应性监测模式（SRM）质谱检测。结果表明：在灵芝基质中，多菌灵在 1～100μg/mL范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系（相关系数r2大于0.996），方法的检出限为0.010 mg/kg。添加水平为 0.05、0.010、0.020mg/kg时多菌灵的平均回收率为94.5%～98%，相对标准偏差范围为2.3%～7.2%，均符合农药残留检测要求。该方法高效快捷、灵敏、准确，适用于灵芝中多菌灵的快速检测 [关键词]QuEChERS ；高效液相色谱-串联质谱；多菌灵；灵芝 中图分类号：S481.8 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2017）02-0187-02 0 引言 近年来，随着人们物质生活的不断富裕，人们越来越重视健康养生。灵芝，因其具有补气安神、保肝解毒、改善心血管系统、治疗糖尿病、止咳平喘、治疗眩晕不眠、心悸气短、虚劳咳喘等功效[1]，被人们广泛用来食疗养生。灵芝煲汤、灵芝泡酒、?`芝煎水等，老人长期服用可以以治疗慢性病，小孩长期服用可以增强抵抗力，强身健体，女人长期服用养颜美白，增强肌肤弹性 多菌灵（carbendazim），化学名称2-（甲氧基氨基甲酰）苯并咪唑[2-（methoxy-carbanmoyl）-benzimidaxole]，是一种高效低毒、广谱内吸性杀菌剂，广泛用于果蔬、食用菌等多种作物生长期和储存期真菌性病害的防治。多菌灵在自然环境中降解较慢，且有一定的毒性，如果食用了多菌灵残留量过高的灵芝，严重影响其安全性和保健功效的发挥，给人们身体健康带来隐患[2]，因此，研究其检测方法对监控和加强我国果蔬、中药保健品的安全状况具有重要的意义 目前多菌灵的检测方法有气相色谱法、紫外分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法及离子交换法，其中紫外分光光度法选择性低，样品前处理繁琐，检测周期长，荧光分析法操作比较繁琐且易受干扰，而液相色谱法需要对样品进行衍生化处理，前处理复杂，选择性差，灵敏度受到限制，不同的样品必须采用不同的色谱条件，方法的通用性和耐用性不强。为此，本实验采用高选择性、高灵敏度的质谱检测器，以灵芝为研究对象，建立了检测多菌灵残留的QuEChERS-液相色谱-串联质谱方法。本方法通用性强，可为测定灵芝中多菌灵残留标准提供依据 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 1.1.1 仪器：Acquity UPLCH-CLASS/Xero TQD液相色谱串联质谱联用仪 （美国 WATERS公司 ）； Milli-Q？Direct超纯水仪（莱伯泰科）；MISTRAL LCMS EVO LUTION氮气发生器；SIGMA Sartorius3-18ks高速冷冻离心机；美 国Organomation N-EVAP 112氮吹仪；Elmasonic超声波清洗器；IKA高速匀浆机；赛多利斯股份公司电子天平；江苏涡旋混合器；江苏摇床； 1.1.2 试剂：乙腈（色谱纯 ，德国 Merck公司）、甲酸（色谱纯 ，德国 Merck公司）、氯化钠（分析纯）、无水硫酸镁（分析纯）、石墨化炭黑（GCB）、乙二胺 -N-丙基硅烷 （PSA）、多菌灵标准品（农药标准品，环境保护部标准样品研究所）、灵芝（购于珠海某药房） 1.2 实验方法 1.2.1 标准溶液配制 准确称取多菌灵标准品 ，用甲醇溶解配成浓度为 100 mg /L的标准储备液，储存于冰箱。使用时先用甲醇稀释成浓度为10mg /L的标准溶液，再用灵芝基质乙腈水（1：2）稀释成浓度为5μg /L、10μg /L、20μg /L、50μg /L、100μg /L的系列标准溶液 1.2.2 样品处理 准确称取粉碎后的灵芝 2. 0 g于 50 mL离心管中， 加入 20mL乙腈，斡旋混匀，浸泡2h，在35℃下超声15min，取出放摇床振荡15min，8000r/min离心5min，取上清液5mL，置于1mL QuEChERS管中，管中包括0.15g乙二胺 -N-丙基硅烷 （PSA）吸附剂和0.85g无水硫酸镁，摇床振荡10min，8000r/min离心5min，取上清液1mL过0.2μm有机系微孔滤膜后，于HPLC-MS分析 1.2.3 实验条件 （1）色谱条件 ACQUITY UPLC？BEH C18柱（2.1 mm×50