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基于可开启微流控芯片循环肿瘤细胞捕获及单个细胞提取 　　摘要：介绍了一种可开启微流控芯片。基于细胞的物理尺寸特性该芯片可对外周血循环肿瘤细胞（circulatetumorcells，CTCs）进行分选富集及单个细胞的提取。可开启微流控芯片的结构简单，简化了制作流程。该文以前列腺癌细胞PC3为目标靶细胞，结合显微切割原理，实现了对该细胞分选富集、转印及单个细胞的提取，从而提高了CTCs检测的纯度。本文主要研究了可开启细胞捕获芯片的制作及单个细胞提取的方法。结果表明该芯片可以高效捕获到循环肿瘤细胞并且能从捕获到的细胞中任意提取单个目标细胞，从而为后续探讨肿瘤细胞的生物学机制和转移机制提供了很好的基础与平台 关键词：循环肿瘤细胞；可开启微流控芯片；单细胞；转印 中图分类号：TP311 文献标识码：A 文章编号：1009-3044（2017）03-0229-03 Circulating Tumor Cell Capture and Single Cell Extraction Based on an Openable Microfluidic Chips FANG Yi，QIN Lu-man，LIU Kan，ZHANG Nan-gang （Wuhan Textile University，Wuhan 430073，China） Abstract： An openable microfluidic chip is introduced，which is based on the physical size of the cells， for enriching the peripheral blood circulating cells （CTCs） and extract singlecell. The chip has simple structure and simplifies the production process. In this study， the prostate cancer cellsis used as the target cell， combined with the principle of micro-cutting， achieved the cell sorting enrichment， transfer and single cell extraction， thereby enhancing the CTCs detection purity. In this paper， we mainly study the fabrication of cell-capture chip and the method of single cell extraction. The results showed that the chip could efficiently capture the circulating tumor cells and could extract a single target cell from the captured cells， thus providing a good foundation and platform for the follow-up study of the biological mechanism and metastasis mechanism of tumor cells Key words： circulating tumor cell；openable microfluidic chip； single cell； transfer 肿瘤是目前危害人类生命健康最严重的疾病之一。近20 年来，我国癌症发病率和死亡率呈明显上升趋势[1]。目前现代医学的治疗方法可以预防原发肿瘤细胞的生长，但是越来越多生物学和临床研究结果表明肿瘤患者致死的主要原因是由于肿瘤的侵袭和转移而并非原发病灶。肿瘤转移疾病所引起的死亡占实体瘤所致死亡的90%左右，因此肿瘤转移的早期准确检测就显得尤为重要[2]。循环肿瘤细胞（CTC）是指脱离原发肿瘤病灶，侵袭并进入淋巴管、血液等循环系统的肿瘤癌症患者外周血中的循环肿瘤细胞，常用作肿瘤转移的可靠生物标志物检测和预后监测[3-4]。但是CTC在外周血中的含量极低，约109个细胞中才会发现1至10个，因此CTC的检测及分离在技术实现上非常具有挑战性[5]。就目前而言，主要面临的两大挑战：捕获效率和纯度 CTC检测常用的方法主要有两种[6-7]，一种是基于细胞的生物化学特性也就是特定抗原抗体[8]之间的反应，另一种则是基于细胞的物理特性，如细胞间的物理特性差异，如尺寸[9]