1.1生态工程基本操作工具.pptVIP

桂阳一中 专题1 基因工程 路漫漫其修远兮，吾将上下而求索。 ----屈原 桂阳一中 什么叫基因工程？ 基因工程，又叫DNA重组技术。指按照人们的愿望，在DNA分子水平上进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 1.1 DNA重组技术的基本工具 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 抗虫基因与载体“缝合” 抗虫基因导入棉花细胞 “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶 “分子缝合针”—— DNA连接酶 “分子运输车”—— 载体 一、限制性内切酶——“分子手术刀” 主要从原核生物中分离纯化出来。 ②种类： 已从近300种微生物中分离出4000种限制酶。 ③作用： 1.能识别双链DNA的某种特定核苷酸序列。 2.使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 ①来源： 限制性内切酶在原核生物中的作用是什么？ 切断外源DNA，使之失效，从而达到保护自身的目的。 A 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 C 一个核苷酸核糖上第3位的羟基与下一个核苷酸核糖上第5位的磷酸羟基脱水缩合成酯键，该酯键称3,5磷酸二酯键。 磷酸二酯键 切割位点 一、限制性内切酶——“分子手术刀” ④作用特点： 特异性 即：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成 少数的识别序列由4、5或8个核苷酸组成 ⑤限制酶的识别序列： 想一想限制酶所识别的序列有什么特点？ 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线（如图），中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向、对称、重复排列的。 限制酶所识别序列的特点： EcoR I 限制酶的切割 　 黏性末端　　　　 黏性末端 大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)只能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 Sma I 限制酶的切割 SmaⅠ 平末端　　　平末端 只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。 【随堂检测】 1、下列黏性末端属于同种内切酶切割而成的 是（ ） A、①② B、①③ C、①④ D、②③ A G T C T C C A ③ T C G A G C T T A A ① A A T T C G ② A G C T T C A G ④ A 【随堂检测】 2.下列有关基因工程中限制酶的描述，错误的是（ ） A.一种限制酶只能识别一种特定的脱氧苷酸序列 B.限制酶的活性受温度的影响 C.限制酶能识别和切割RNA D.限制酶可从原核生物中提取 C 【随堂检测】 3.下列实践活动包含基因工程技术的是（ ） A.水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因纯合新品种 B.抗虫小麦与矮杆小麦杂交，通过基因重组获得坑虫矮杆小麦 C.将含有抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株 D.用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子改善发生变异的大豆 C 【随堂检测】 4.下列关于基因工程的说法中，正确的是（ ） A.基因工程的设计和施工是细胞水平上进行的 B.基因工程都是在生物体外完成的 C.基因工程是对蛋白质进行的操作 D.基因工程能打破物种的界限，定向改造生物性状 D 【思考?讨论】 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？ 要切两个切口，产生四个黏性(平)末端。 如果把两种不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？如果把同一个DNA分子用不同的限制酶来切割，结果又会怎样呢？ 不同的DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同； 同一个DNA分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不同。 【寻根问底】 1、联系你已有的知识，想一想，为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA？ 1）细菌本身不含这种限制酶的识别序列。 2）细菌通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使之不能切开。 2、限制性内切酶和DNA水解酶的区别是什么？ 二、DNA连接