转染试剂使用说明书.pdf

◆ GenFectinTM基因转染试剂 ◆ 目录号 2101 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 GenFectinTM 基因转染试剂 目录号：2101 目录编号 包装单位 使用次数 0.5ml可进行250次转染 210101 0.5ml （6孔板或35 mm平皿） 1ml 可进行500 次转染 210102 1ml （6孔板或35 mm平皿）  适用范围及特点： 1. 适应于众多原代培养细胞和转化细胞株的基因转染 2. 适用于瞬时转染和稳定转染 3. 适应于贴壁细胞和悬浮细胞转染 4. 转染效率高且稳定，在有无血清存在的细胞培养基中均能获得高效率转染 5. 细胞毒性低 6. 转染程序简单，转染实验可以在半小时内完成  产品储存： GenFectinTM (1.0mg/ml) 在室温下运输，试剂到时请即存放于4 ℃，在4 ℃可存放 一年以上。使用前请涡旋振荡混匀。 - 1 -  产品介绍： 基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。目前，最常 用的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合物，它们的特点和病毒类似，容易透过细 胞膜。其中，阳离子脂质体在体外基因转染中有很高的效率，然而在体内，它迅速被 血清清除，在肺组织内累积，诱发强烈的抗炎反应，这将导致高水平的毒性，因此， 在很大程度上限制了其应用。由于阳离子脂质体的局限性，阳离子聚合物转染试剂日 益受到重视。 本试剂采用专利配方的阳离子聚合物为主要成分，可以与 DNA 形成稳定的复合 物，保护DNA 免受核酸酶的降解,在增加核酸稳定性的同时, 提高转染试剂/DNA 复合 体穿越细胞膜的效率，这种独特设计，显著提高了基因转染效率。此类试剂是目前非 病毒介导方法中效率最高的转染试剂（不同种类细胞的转染效率可有明显差异）。此外 GenFectinTM 不被血清清除，血清和抗生素不影响其转染效果，转染试剂/DNA 复合物 可以直接加入完全细胞培养基中。GenFectinTM 的细胞毒性很小，在适宜的条件下，根 据推荐用量使用 GenFectinTM 进行转染实验，细胞存活率高于 90%.每一批产品出厂前 都要对其转染效率和毒性经过严格质控。 - 2 - 18-24 hr 去除培养液 r 细胞接种 传统转染实验程序 培养 PBS 清洗细胞 3-4 hr 24-48 hr 加入传统转染试剂 /DNA 复合物 更换培养液 转染结果分析 温育 培养 18-24 hr 24-48 hr 加入GenFectin 转染 细胞接种 转染结果分析 试剂/DNA 复合物 培养 培养 GenFectin 转染实验程序 图1. GenFectin 转染与传统转染实验程序比较  注意事项： 1. 少量使用GenFectinTM 时，可取精确量的GenFecti