11分子荧光分法.pptVIP

化学分析（Ⅱ） 基本要求 掌握分子荧光的发生过程，激发光谱和发射光谱，荧光光谱的特征，分子结构与荧光的关系；影响荧光强度的因素，荧光定量分析方法。 熟悉分子从激发态返回基态的各种途径，荧光寿命与荧光效率。 了解荧光分光光度计与其他荧光分析技术。 处于基态的分子吸收能量被激发至激发态，然后从不稳定的激发态释放能量返回至基态。如果通过碰撞以热能或动能的形式释放能量回到基态，称为无辐射跃迁；如果是以辐射(发射光子)的形式回到基态，此种现象称为光致发光。常见的光致发光包括荧光和磷光。 荧光分析法 定义：根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法。 荧光分析法的特点 灵敏度高：检测限0.0001 μg/mL, 比分光光度法高2～4个数量级。 （在黑背景下检测；光源的强度大） 选择性高： 适当选择激发光的波长和荧光测定的波长； 应用荧光寿命的差别 –时间分辨技术。 第一节 荧光分析法的基本原理 一、分子荧光 2. 荧光的产生 辐射跃迁－发光失活 荧光：激发态分子从第一激发单线态S1的最低振动能级回到基态S0所发出的辐射。 磷光：激发态分子从第一激发三重态T1的最低振动能级回到基态S0所发出的辐射。 波长关系：激发光＜荧光＜磷光。 无辐射失活 a.振动弛豫：激发态分子由同一电子能级中的较高振动能级转至较低振动能