miR-580对乳腺癌细胞系中Twist1调节作用.PDFVIP

临床与病理杂志 2015, 35(6) J Clin Path ol R e s 1065 doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.06.038 View this article at: /10.3978/j.issn.2095-6959.2015.06.038 miR-580对乳腺癌细胞系中 Twist1的调节作用 孟庆威 ，孙嘉 ，纪春连 ，席玉慧1 1 1 2 (1. 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内四科，哈尔滨 150081；2. 哈尔滨医科大学病理生理教研室，哈尔滨 150081) [摘　要] 目的：探讨miR-580 在MCF-10A 细胞系中对Twist1 的调节。方法：本实验利用生物信息学方法预测 Twist1 的靶miRNA 是miR-580 。首先，采用qPCR法检测在MCF-10A 系列细胞系中Twist1及miR-580 的表达。然后，在MCF-10A 细胞系中分别转染miR-580类似物和miR-580抑制物后，利用RT-PCR 、 t Western blot 、 检验分析Twist1 的表达及细胞迁移能力的变化。最后利用荧光素酶实验验证miR-580 通过结合在Twist1 的3UTR调节其表达。 结果： 1)在MCF-10A 细胞系中Twist1 与miR-580 的表达呈 负相关；2)在MCF-10A 细胞系中转染miR-580类似物后，Twist1 的表达下调；在MCF-10A 细胞系中 转染miR-580 抑制物后Twist1 的表达上调；3)在MCF-10A 细胞系中引入miR-580 类似物后细胞迁移 能力降低；4)miR-580 直接结合在Twist1 的3UTR 。结论：miRNA-580 在MCF-10A 细胞系中通过结 合在Twist1 的3UTR负向调节Twist1 的表达从而克制细胞的迁移。 [关键词] 乳腺癌；Twist1 蛋白；miR-580 ；细胞迁移 Twist1 regulation by miR-580 in breast cancer cell lines 1 1 1 2 MENG Qingwei , SUN Jia , JI Chunlian , XI Yuhui (1. Forth Department of Medicine Oncology, Harbin Medical University Cancer Hospital, Harbin 150081; 2. Department of Pathophysiology, Harbin Medical University, Harbin 150081, China) Abstract Objective: To explore the role of miR-580 in regulating Twist1 expression in MCF-10A cell line. Methods: By bioinformatics, we postulated that miR-580 is one of the regulators of Twist1. First, qPCR was used to evaluate the expres